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【例证1】(2011·南通模拟)如图为细胞融合的简略过程,请据图回答:(1)若A、B是植物细胞,在细胞融合之前已用________处理,除去了___;A、B到C的过程中,常用的物理方法是_____。融合完成的标志是__________。(2)若A、B是植物细胞,则形成的D细胞还要应用_______技术把D培养成植株。(3)若A、B是动物细胞,一般取自_______,然后用____使其分散开来,A、B到C的过程中,常用的不用于植物细胞的手段是_________,所形成的D称为_________。(4)若该过程是制备单克隆抗体,A为小鼠B淋巴细胞,那么,在获得此细胞之前,小鼠已被注射了_________。注射后小鼠身体产生了相应的_________,生成了_________。图中B为__________。(5)若该过程仍是制备单克隆抗体,在A、B到C的过程中,所形成的C有________种,用来培养的D细胞应该是________,从中选择出它的方法是用_________培养,获得D后,常用的培养方法是_________和_________。 【解题关键】解答本题关键是明确以下几点:(1)动植物细胞融合的原理、手段、基本过程和目的的异同;(2)细胞融合的意义及应用。【精讲精析】本题主要考查动物细胞融合的过程和应用。(1)(2)若是植物细胞融合,应先用纤维素酶和果胶酶处理,除去细胞壁,获得原生质体;诱导原生质体融合常用的物理方法是振动、离心、电激,融合完成的标志是产生杂种细胞。融合后形成的D细胞要用植物组织培养技术培养成植株。(3)若是动物细胞融合,则融合前培养的动物细胞A、B一般取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,然后用胰蛋白酶处理,使其分散开来,诱导融合的方法除物理法和化学法外,还可用灭活的病毒,融合后所形成的细胞称为杂交细胞。(4)(5)若要制备单克隆抗体,应用小鼠已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。因此,在获得效应B淋巴细胞之前,要给小鼠注射抗原。注射后小鼠身体产生了相应的免疫反应,生成了效应B淋巴细胞、抗体、记忆细胞等。诱导融合时,可以是相同细胞融合,也可以是不同细胞融合,因此,形成的融合细胞有3种,需在特定的培养基上选择培养。获得特定杂交瘤细胞后,可用体内培养和体外培养的方法获得大量单克隆抗体。答案:(1)纤维素酶和果胶酶 细胞壁 振动、离心、电激 产生杂种细胞(2)植物组织培养(3)动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 胰蛋白酶 灭活的病毒诱导 杂交细胞(4)抗原 免疫反应 效应B淋巴细胞、抗体、记忆细胞 骨髓瘤细胞(5)3杂交瘤细胞 特定的选择培养基 培养液中培养 注射到小鼠腹腔内增殖【互动探究】(1)图中的A、B细胞可以分别是动物细胞和植物细胞吗?如果可以,融合前需要进行何种操作?提示:可以,但形成的杂种细胞不能形成个体。融合前植物细胞要除去细胞壁。(2)制备单克隆抗体时用到了哪些技术手段?其中有核移植技术吗?提示:用到了动物细胞融合、动物细胞培养、杂交瘤细胞的筛选等技术手段,没有用到核移植技术。【例证2】(1)特异性抗体获取的方法可用单克隆抗体制备。在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程的技术是____________。(2)如图是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是_________细胞,该细胞能够产生_______,从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射特定的物质是_______。②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的_________、聚乙二醇或电激等诱导。③特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有_________、__________、__________等优点。(3)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有__________。(4)单克隆抗体技术还有哪些用途?___________。【精讲精析】本题考查动物细胞的培养、单克隆抗体的制备以及特异性免疫的有关内容。(1)在制备单克隆抗体的过程中应用的动物细胞工程技术是动物细胞培养和动物细胞融合。(2)①从图中看出,用于形成杂交瘤细胞的是B淋巴细胞(效应B淋巴细胞),能产生抗体;应给小鼠注射特定的物质是抗原或狂犬病病毒。②细胞融合的方法有用灭活的仙台病毒、物理方法和化学方法。③单克隆抗体的特点是特异性强,灵敏度高,可大量制备。(3)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有无菌无毒、适宜的温度和pH、气体、营养物质等。(4)单克隆抗体技术可作为诊断试剂、运载药物(或生物导弹)等。答案:(1)动物细胞培养和动物细胞融合技术(2)①B淋巴
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