王镜岩生物化学课件004酶.pptxVIP

????????; The application of enzyme has a much longer history than that of enzymatic research. ;酶的发现及研究历史;enzyme (in yeast);;1941-1943年 生产胰岛素和胰蛋白酶的新方法； 1963年 碱性蛋白酶--洗涤剂用酶的突破； 1967年 微生物筛选； 1982年，T.R.Cech和S.Altman从四膜虫中发现核酶，即Ribozyme； 1984-1986年 第一个由基因修饰的微生物 (GMO) 生产的酶； 1992年 建立用于酶工业生产的克隆表达； 1995年，Jack W. Szostak研究室首先报道了具有DNA连接酶活性DNA片段，称为脱氧核酶(Deoxyribozyme)； ; 酶是一类具有高效率、高度专一性、活性可调节的生物催化剂。;①催化效率高，用量少（细胞中含量低）。 ②加快反应速度，缩短达到化学平衡的时间，但不改变化学反应平衡点。 ③降低反应活化能。 ④反应前后自身结构与数量不变。; 酶催化反应速度是相应的无催化反应的108-1020倍，并且高出非酶催化反应速度107~1013倍。;少数酶是RNA（核酶）;全酶（holoenzyme)=脱辅基酶（apoenzye)+辅因子(cofactor) 例如：超氧化物歧化酶(Cu2+、Zn2+）、乳酸脱氢酶（NAD+）;;酶蛋白决定酶促反应的专一性（特异性）;酶的一些辅助因子;金属离子的功能: 组成酶的活性中心； 是连接底物和酶分子的桥梁； 参与催化反应，传递电子； 稳定酶分子的构象； 正电荷可中和底物的阴离子，降低反应中的静电斥力等。; 牛胰RNase 124a.a 单链 鸡卵清溶菌酶 129a.a 单链 胰凝乳蛋白酶 三条肽链;2、寡聚酶; 大肠杆菌丙酮酸脱氢酶复合体由三种酶组成： ①丙酮酸脱氢酶（E1） 以二聚体存在 2×9600 ②二氢硫辛酸转乙酰基酶（E2） 70000 ③二氢硫辛酸脱氢酶（E3） 以二聚体存在 2×56000 ? 12个E1 二聚体 24×96000 24个E2 单体 24×70000 总分子量：560万 6个E3 二聚体 12×56000 ; 该酶是四聚体α4，每条肽链含两个活性区域：N-端区域是Asp激酶，C端区域是高Ser脱氢酶。;四、酶的分子结构与催化活性;（二）酶的活性中心; 酶分子中存在的各种化学基团并不一定都与酶的活性有关。其中那些与酶的活性密切相关的基团做酶的必需基团(essential group)。 这些必需基团在一级结构上可能相距很远，但在空间结构上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，能与底物特异地结合并将底物转化为产物。对于结合酶来说，辅酶或辅基参与酶活性中心的组成。;必需基团（essential group ）：——与酶活性密切相关的基团;——与酶的催化活性直接相关的化学基团 常见：His-咪唑基、Ser-OH、 Glu γ-COOH、Cys-SH、Asp-COOH;结合部位（binding site）： 由有一定特性的基团组成，一定的底物靠此部位结合到酶分子上，此部位决定酶的专一性。 催化部位（catalytic site）：由一些参与催化反应的基团组成，起催化作用，底物分子中的化学键在此部位被打断或形成新键，从而发生一定的化学变化，此部位决定酶的催化高效性。;糜蛋白酶结构;（三）酶活性中心的共同特点: ;五、? 酶的分类及命名;2、国际系统命名;国际系统分类法及编号（EC编号）;第一个数字表示大类： 氧化还原 第二个数字表示反应基团：醇基 第三个数字表示电子受体：NAD+或NADP+ 第四个数字表示此酶底物：乙醇，乳酸，苹果酸。;3、氧化还原酶类;4、转移酶类;;6、裂合酶类（裂解酶）;;8、合成酶（连接酶）;◆国际分类的盲区：忽略了酶的物种差异和组织差异;六、酶的活力测定与分离纯化;?研究酶促反应速度，以酶促反应的初速度为准(底物消耗≤5%）。 ;2、酶的活力单位（U）;酶反应的最适条件;其他酶单位定义方法;酶的比活力是分析酶的含量与纯度的重要指标。;? ; ;第二节?? 酶促反应动力学; 一级反应：反应速率只与反应物浓度的一次方成正比。 二级反应：反应速率与反应物浓度的二次方（或两种物质浓度的乘积）成正比。 零级反应：反应速率与反应