第四章病毒与亚病毒.pptVIP

噬菌体的发现 1915年，英国人陶尔德（Twort）在培养葡萄球菌时发现了透明斑 1917年，法国人第赫兰尔（d′Herelle）在巴斯德研究所也观察到溶菌现象 被后人称作陶尔德——第赫兰尔现象，细菌被一种更小的生物溶解了，这种生物被称为噬菌体。 噬菌体的结构 噬菌体的生活周期 能在宿主细菌细胞内增殖，产生大量子代噬菌体并引起宿主菌裂解的噬菌体被称为烈性噬菌体（virulent phage）。 烈性噬菌体所经历的繁殖过程称为裂解性生活周期（lytic cycle）或增殖性生活周期（productive cycle）。 另一些噬菌体在进入寄主细胞后，并不立即进行复制，而是将其核酸整合到寄主染色体上，并能够伴随寄主细胞的生长繁殖而将病毒基因组传递给子代寄主细胞，噬菌体通常被称之为温和噬菌体（temperate phage）。 在极少数情况下（如紫外照射等），温和噬菌体也会经诱变完成裂解性生活周期。 类病毒的致病机理 干扰了宿主正常的生理代谢 类病毒的核酸序列与宿主细胞中的一些RNA分子具有序列相似性，如 5.8S 和 28S 的rRNA内含子序列有相似性； 影响细胞中mRNA转录后加工。 1981年，Randles，绒毛烟斑驳病毒（VTMoV） 廿面体（ 30nm ） 基因组： ①RNA1——1.5×106 Da的大分子、线状、ssRNA ②RNA2——0.12×106 Da的环状、ssRNA ③RNA3——RNA2的线状形式 Haseloff将这种新型的类似于类病毒的环形RNA2分子称为拟病毒。 拟病毒：一种包裹在植物病毒粒子中的小的环状RNA分子。 1982年，美国动物病毒学家Prusiner，在研究羊瘙痒症，发现了一种对人有侵染性的蛋白质颗粒。 朊病毒：一类比类病毒还小的病源物，不含任何种类的核酸，能侵染人和动物并在宿主细胞内复制的小分子无免疫性的疏水蛋白质，称为“prion”，也可写为“Virino”。 朊病毒引起动物和人中枢神经系统退化病，已有几百年历史。 羊瘙痒病（Sxcrapie） 牛海绵状脑炎病（BSE） 人库鲁症（kuru，新几内亚东部高原） 克罗伊茨费尔特-雅各布综合症 ——早老性痴呆症（CJD） 朊病毒的形态结构 在电镜下，朊病毒是呈杆状的颗粒，大小为25nm×100～200nm（一般为125～150nm），2.7×104～3.0× 104 Da。 杆状颗粒不单独存在，呈丛状排列，每丛的大小和形状不一，多时可达100多个杆状颗粒。 朊病毒的性质 1、具有很强的热稳定性： 90℃保持30min不失活，甚至在360℃保持1h不失活。 2、抗辐射：紫外辐射和电离辐射。 3、抗水解：DNA及RNA水解酶、Zn2+所催化的水解反应。 4、对蛋白质变性剂很敏感：如尿素、十二磺酸酯钠、苯酚等。 朊病毒的增殖 朊病毒感染后，可在动物体内产生更多拷贝的病毒蛋白质。 朊病毒是一种由宿主细胞基因组编码的蛋白质，含254个氨基酸。在健康脑组织中以正常构型PrPc出现，主要分布在神经元表面。 其异构型PrPsc只被部分水解，产生1个含141氨基酸的小分子蛋白质，其具有高度抗蛋白酶活性。 传播： 医疗器械消毒不彻底； 器官移植、生物制品药物被污染（角膜、人生长素、促性腺激素）； 硬脑膜嫁接。 PrP构型转换机制 PrPsc的形成通过转译后的修饰过程——构型转变。 PrPc含有4个α螺旋折叠区（H1～H4），占总结构区的40%；而β-折叠区很小。 构型转变主要是N-末端的2个α螺旋区（H1和H2）重新折叠成β-折叠。而C-末端的二硫键仍连接H3和H4，以保持PrPc的稳定性。 PrPc PrPSc 作业 1、以E.coli T偶数噬菌体为例，阐述病毒繁殖过程？ 2、什么是一步生长曲线？它可分几期？各期有何特点？ 2、噬菌体效价的测定 (1) 效价：表示每ml试样所含的具有侵染性的噬菌体粒子数。 (2) 双层平板法 底层（~2%琼脂培养基7~8 ml） 双层平板法 培养基（~1%琼脂培养基3ml）