王镜岩生物化学蛋白质分离纯化以及表征.pptVIP

第7章 蛋白质的分离、纯化和表征 一、蛋白质的酸碱性质 蛋白质的等电点和等离子点 二、蛋白质分子的大小与形状 根据化学组成测定最低分子量 根据化学组成测定最低分子量 渗透压测定的示意图 Van’t Hoff 公式 渗透压法测定蛋白质的分子量 渗透压法测定蛋白质的分子量 沉降分析法测定蛋白质的分子量 超速离心机工作原理 被离心分子的受力分析 沉降速度法Ⅰ 沉降速度法Ⅱ 沉降速度法Ⅲ 沉降速度法Ⅳ 沉降速度法Ⅴ 沉降速度法Ⅵ 氨基酸残基的偏微分比容 沉降平衡法测蛋白质的分子量 沉降平衡法Ⅰ 沉降平衡法Ⅱ 沉降平衡法Ⅲ 沉降平衡法Ⅳ 三、蛋白质的胶体性质与蛋白质的沉淀 蛋白质的胶体性质Ⅰ 蛋白质的胶体性质Ⅱ 蛋白质的沉淀Ⅰ 蛋白质的沉淀Ⅱ 四、蛋白质分离纯化的一般原则 不同离心场下沉降的细胞组分 五、蛋白质的分离纯化方法 根据分子大小不同的纯化方法透析（dialysis）和超滤（ultrafiltration） 根据分子大小不同的纯化方法（密度梯度离心） 柱层析装置图 根据分子大小不同的纯化方法（凝胶过滤层析） 凝胶过滤层析的原理 凝胶过滤层析的洗脱曲线 凝胶过滤法测蛋白质的分子量 利用溶解度差别的纯化方法(等电点沉淀 ) pH和离子强度对β乳球蛋白溶解度的影响 利用溶解度差别的纯化方法(盐溶和盐析 ) 在等电点时中性盐对一氧化碳血红蛋白溶解度的影响 利用溶解度差别的纯化方法