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- 2019-11-12 发布于广东
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* Background provided by m62 Visualcommunications, visit 代谢分析中研究方法 图 细胞在不同水平上对基因改变和环境变化的响应,对于不同水平上各自的高通量研究方法为分析细胞的代谢提供了大量的信息 S.Cerevisiae对不同氮源的吸收利用的途径与机理 谷氨酸和谷氨酰胺在氮代谢中起着重要的作用,氨、谷氨酸和谷氨酰胺之间的相互转化被称为氮的中间代谢途径 (CNR),如图所示。 S.cerevisiae在脯氨酸作为氮源时转录水平的调控机制 吸收转运脯氨酸的两个酶: Gap1p,一般氨基酸的通用的通透酶 Put4p,脯氨酸特异性的通透酶 S.Cerevisiae以葡萄糖、甘油和乙酸为碳源条件下中间代谢途径关键酶活分析 6-磷酸葡萄糖脱氢酶(磷酸戊糖途径) 磷酸烯醇式丙酮羧酸化激酶(糖异生途径) 丙酮酸激酶(糖酵解途径) 异柠檬酸脱氢酶;α-酮戊二酸脱氢酶 (三羧酸循环) 总结 以葡萄糖、甘油和乙酸为碳源,连续培养S.Cerevisiae,测量了在不同培养条件下中间代谢途径一些具有代表性的酶活性。初步分析了为了适应不同的环境胞内代谢体系的一些主要酶活性的响应,为代谢通量的分析提供一些基础信息,实验结果也将结合到代谢通量的研究中。 S.Cerevisiae在不同发酵阶段的菌体生长、底物消耗及部分代谢产物的积累与消耗情况 S.Cerevisiae在发酵不同阶段和以乳酸为碳源下的蛋白质组解析和酶活性分析 图中第一个样品取在葡萄糖作碳源的对数期,第二个样品取在发酵后期,细胞正在消耗乙醇,第三个样品为乳酸作为碳源 总结 通过酶活性检测,在S.Cerevisiae利用葡萄糖为碳源的对数生长期和葡萄糖消耗尽的后期,以及利用乳酸为碳源的情况下,研究了中间代谢途径中的一些关键的酶,分析了胞内的代谢为了适应不同的环境而作的系统而精细的调控,中间代谢途径中一些途径得到强化和激活,一些途径被削弱或阻断,从而维持了细胞在不同环境下生长的需要以及能量的平衡。 展望 燃料乙醇是未来世界能源的主流,将改变世界能源结构。中国应该利用纤维素乙醇作为主要的生物能源,加快以纤维素乙醇为核心的综合技术开发,尽早实现其产业化发展的目标。 对于50年后生物质生物炼制技术的发展状况,可以做出这样的展望:届时将实现淀粉、糖类、纤维素等生物质原料的全部利用,产品多元化,形成生物质炼制巨型行业,部分替代不可再生的一次性矿产资源,初步实现以碳水化合物为基础的经济与社会可持续发展。可以预见,在不远的未来,纤维素乙醇生产将会取得更大突破。 主要参考文献 [1] Wu Y J, Ma H, Liu W W. Enhanced enzymatic saccharification of rice straw by microwave pretreatment[J].Bioresource Technology, 2009, 100: 1279-1284. [2] Ma Teresa García-Cubero, Gerardo González-Benito, Silvia Bolado. Effect of ozonolysis pretreatment on enzymatic digestibility of wheat and rye straw[J]. Bioresource Technology, 2009, 100: 1608-1613. [3] 马英辉, 王联接.秸秆预处理的最新研究进展[J]. 纤维素科学与技术, 2009, 17(3):71-78. [4] A T W M Hendriks, G Zeeman. Pretreatments to enhance the digestibility of lignocellulosic biomass[J]. Bioresource Technology, 2009, 100: 10-18. [5] 田龙,马晓健.纤维素乙醇生产中的预处理技术[J]. 中国酿造,2010,218(5):8-12. [6]郑集,陈钧辉.普通生物化学[M ].北京:高等教育出版社, 2007.325-380. [7]张洪渊.生物化学教程[M ].四川:四川大学出版社,2007.263-297. [8]张慧敏,姚善泾.在不同碳源培养基条件下酿酒酵母蛋白质组解析[J].生物工程学报,2004,20(3):398-402. [9]张慧敏,姚善泾.酵母在不同培养环境下中间代谢途径代谢调控过程的研究[D].浙江:浙江大学材料与化工学院,2005. [10]张志华.粗糙脉孢菌AS
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