H6亚型禽流感病毒RT-LAMP检测方法的建立.PDFVIP

H6亚型禽流感病毒RT-LAMP检测方法的建立.PDF

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微生物学通报 DEC 20, 2011, 38(12): 1855−1861 Microbiology China © 2011 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 生物实验室 H6 亚型禽流感病毒 RT-LAMP 检测方法的建立 1 2* 3 2 1 2 2 2 2 2 周辰瑜 谢芝勋 宋杨 彭宜 陈安莉 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 (1. 广西大学 动物科学技术学院 广西 南宁 530004) (2. 广西兽医研究所 广西 南宁 530001) (3. 广西南宁市动物卫生监督所 广西 南宁 530001) 摘 要: 建立一种快速、敏感、特异的检测 H6 亚型禽流感病毒(AIV)逆转录环介导等温扩增 (RT-LAMP)检测方法。根据H6 亚型AIV 血凝素(HA)基因序列的保守区 8 个位点设计了6 条特异 性LAMP 引物, 以H6 亚型AIV 阳性样品RNA 为模板进行一步法扩增, 对反应条件和反应体系进 行优化。结果表明该方法的特异性良好, 对其他呼吸道病原体均无扩增反应。该方法灵敏度高, 最 低可检测到H6 亚型AIV RNA 为0.01 pg, 该方法无需特殊仪器, 只需在水浴锅中进行, 是一种适 于基层的简便、灵敏、快速的H6 亚型AIV 检测方法。 关键词: H6 亚型禽流感病毒, 逆转录环介导等温扩增, 特异性, 敏感性 Establishment of a reverse transcription loop-mediated isothermal amplification assay for detection of H6 subtype avian influenza virus ZHOU Chen-Yu1 XIE Zhi-Xun2* SONG Yang3 PENG Yi2 CHEN An-Li1 LIU Jia-Bo2 PANG Yao-Shan2 DENG Xian-Wen2 XIE Zhi-Qin2 XIE Li-Ji2 (1. College of Veterinary Medicine, Guangxi University, Nanning, Guangxi 530004, China) (2. Guangxi Veterinary Research Institute, Nanning, Guangxi 530001, China) (3. Guangxi Animal Health Inspection, Nanning, Guangxi 530001, China) Abstract: To develop a rapid sensitive and specific method of a reverse transcriptio

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