蛋白质剪切及其应用.pdf

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’( ) ! *’ )# 年 月 #$$% % !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +,-./ #$$% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 蛋白质剪切及其应用 宋利萍 黄华! （中国科学院遗传与发育生物学研究所，北京 !$$!$!） 摘 要 蛋白质剪切是一种翻译后修饰事件，它将插入前体蛋白的中间的蛋白质肽段（ ， CA6 A6-,( D-’A6 E-,?0 ）剪切出来，并用正常肽键将两侧蛋白质多肽链（ ， ）连接起来。在此过程中不需要 ;6A :9A6 E(,F? D-’A6 E-,?;6AB 辅酶或辅助因子的作用，仅需四步分子内反应。CA6 及其侧翼序列可以通过突变产生高度特异性的自我切割用 于蛋白质纯化、蛋白质连接和蛋白质环化反应，在蛋白质工程方面有广泛的应用前景。 关键词 蛋白质内含子，蛋白质剪切，环状肽，纯化，蛋白质工程 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） G3!1 H !$$$0%$3! #$$% $#0$#40$3 世纪 年代，蛋白质剪切的发现开辟了生物化学的 突变研究及序列数理统计研究表明 普遍拥有这种双结 #$ $ A6 ［，］ 新篇章。自从第一个蛋白质剪切元件———芽殖酵母中的 构域结构4 7 。30% +HC A6 以及 4/) P6.H A6 的自导 +H A6 基因被报道以来，在真细菌、古细菌、单细胞真核 引核酸内切酶结构域的缺失可产生仅具有蛋白质剪切功能 ［］ ［，］ 生物中已经陆续发现了 !!2 种 A6 ! 。蛋白质剪切元件 的微A6 3 1 。45% QR-H 在天然状态下就缺乏内切酶结构 ——— 对于蛋白质工程来说是一个功能强大的工具。 域，但仍具有蛋白质剪切活性。这些发现提示 的 端 A6 C0 A6 O A6 载体不仅可用于纯化，表达毒性蛋白，而且可以产生CIJ 及* 端可组装成蛋白质剪切的功能性结构域，而位于中间 （ ）所需的活性末端，引入在核糖 的结构域对于蛋白质剪切并不重要。但也