《禽源与鼠源U6启动子对鸡马立克氏病病毒_gIgE基因shRNA干扰活性的比较》-毕业论文（设计）.docVIP

河北北方学院学士论文 PAGE PAGE 12 学号：20071040132 河北北方学院毕业论文 禽源与鼠源U6启动子对鸡马立克氏病病毒 gI/gE基因shRNA干扰活性的比较 Comparison of interfering effect of shRNA against Marek’s disease gI/gE gene under chicken or mouse U6 promoter 学 生： 指导教师： 院 系： 动物科技学院动医系 专 业： 动植物检疫 班 级： 2007级 论文提交日期：2011年06月09日 目 录 TOC \o 1-4 \h \z \u 引言 3 1 材料 4 1.1工程菌、细胞、质粒及毒株 4 1.2主要试剂和仪器 4 2 方法 5 2.1不同来源的U6启动子驱动siRNAs的效果评价 5 3 结果 5 3.1不同的启动子驱动siRNAs的效果评价 5 4 讨论 8 4.1禽源U6和鼠源U6在不同细胞中表达siRNAs的效率 8 5 结论 9 参考文献 10 致 谢 12 禽源与鼠源U6启动子对鸡马立克氏病病毒 gI/gE基因shRNA干扰活性的比较 吴习花 (河北北方学院 动物科技学院 动植物检疫专业) 指导教师：崔红玉 摘 要：鸡马立克氏病(Mareks disease，MD) 是由马立克氏病病毒（MDV）[1]引起的一种免疫抑制性肿瘤疾病。用已构建好的带有禽源启动子的重组质粒pcU6-shgI735和pcU6-shgE936和带有鼠源启动子的重组质粒pmU6-shgI735、pmU6-shgE936，随报告质粒pEGFP-gI或pEGFP-gE分别共转染DF1、MDCK、Vero细胞[2]，比较了禽源U6和鼠源U6启动子的驱动siRNAs[3]的转录活性。结果显示，在DF-1细胞上禽源U6驱动特异性siRNA对gI、gE[4]基因抑制率分别为87.39%和 85.04% ，其活性是哺乳动物细胞1.21-1.45倍，差异显著（p0.05）.并且在禽源细胞上转录活性略高鼠源U6 启动子1.08～1.13倍，差异不显著；而鼠源U6启动子在哺乳动物细胞（猴源Vero、狗源MDCK）上转录活性是禽源U6 启动子1.24～1.54倍，驱动的特异性siRNA沉默基因的效果显著优于禽源U6启动子（p0.05）。 关键词：U6启动子；马立克氏病病毒；gI基因；gE基因；siRNA Comparison of interfering effect of shRNA against Marek’s disease gI/gE gene under chicken or mouse U6 promoter Wu Xihua (Department of Animal and Plant Quarantine, College of Animal Science and Veterinary Medicine, Hebei North University) Guide Teacher:cui hongyu Abstract:Mareks disease is an immune suppression tumosis caused by Marek s disease virus.The recombinant plasmids pcU6-shgI735, pcU6-shgE936 containing chicken U6 promoter and pmU6-shgI735, pmU6-shgE936 containing mouse U6 promoter were constructed previouly. Then these recombinant plasmids were co-transfected respectively into DF-1, Vero and MDCK cell line with plasmids pEGFP-gI or pEGFP-gE reporter plasmid respectively to measure gI and gE gene knock down efficiency on different cell lines and compare the shRNA expression efficiency driven by chicken U6 and mouse U6 promoter.This paper revealed t