体系分离纯化乳酸脱氢酶.pdfVIP

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2019-12-01 发布于天津
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体系分离纯化乳酸脱氢酶.pdf

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　　　　　　　 Journal of China Pharmaceutical University　2002, 33(4): 339～ 343 339 80-- 邹　群 , 孙小梅, 李步海 (, 430074) 　　　利用三嗪类染料 3 - 修饰的吐温 80,与磷酸钾盐构建染料配基吐温 80- Cibacron Blue F G A 盐液-固亲和萃取体系,从猪肌匀浆液中分离纯化乳酸脱氢酶。　成相染料配基吐温 80浓度为 15% (其中吐温 80中含染料配基吐温 80为 10% ) ;成相磷酸钾盐浓度为 1. 49 mol/L( pH 8. 50); 匀浆液加入量为体系的 1% , 一次成相正萃取。将吐温 80相保温溶解 ,改变磷酸钾盐浓度为 0. 91 mol /L,二次成相反萃取。　一次成相正萃取吐温 80相平均酶活收得率 97% ,纯化 8. 0倍。二次成相反萃取,盐水相酶活收得率近 100% , 实现了酶与吐温 80相的分离。　三嗪染料配基吐温 80-磷酸盐液-固萃取体系,分离纯化乳酸脱氢酶,具有良好选择性和分离纯化效果。对其进一步研究与开发,具有较大实际应用价值。　 Cibacron Blue F3G-A; 吐温 80; 液-固萃取; 乳酸脱氢酶; 猪肌; 分离; 纯化 : 503　　: 　　: 1000-5048( 2002) 04-0339-05 Q A 　　 3 - Cibacron Blue F G A ,。 , , + + 。 N AD ( H) , N ADP 1. 3 - - -80 ( ) , 、、、 Fig The structure of Cibacron Blue F G A modified Tw een H ATP 、、、 DN A 1　 [1] 。 , PEG, 1. 1　材料 [2-4 ] 1. 1. 1　主要仪器　DS-1( , 。 - ); -20 ( --, GL B [ 5～ 8] );(); 752 。 3 - 、 721- Cibacron Blue F G A [9] ()。 80 。 ( Cibacron [10] Blue F3G-A) 80 1。 1. 1. 2　猪肌匀浆的制备　 80-- 。、 280 g , , 4℃, 30 , 4℃ 500 , 15 。