细菌和病毒的遗传第七章大学.ppt

;;;一、细菌的结构;二、病毒的结构;; ;四、细菌和病毒的研究方法;2．影印法测定变异 采用影印法测定细菌是否发生变异以及发生何种变异。 细菌变异主要有形态特征变异和生理特性变异。 形态特征变异：菌落大小、形状、颜色 生理特性变异： （1）营养缺陷型：丧失合成某种营养物质的能力，在基本培养基上不能生长。 原养型（野生型）：能够在基本培养基上生长。 （2）抗性突变：抗药性和抗感染型。;细菌的影印培养方法（Lederberg, 1952）;病毒的研究方法： 1. 获得变异 亚硝酸、羟胺、乙基黄酸乙酯（EES）等化学药剂诱导发生变异。 常见变异： 寄主范围变异：野生型（h＋）：感染B菌株，产生半透明斑；突变型（h）：感染B和B/2菌株，产生透明斑。 噬菌斑突变：野生型（r＋）：产生正常斑，小而边缘模糊；突变型（r）：产生突变斑，大而边缘清晰。 所以：h+r感染B菌株产生半透明大斑；hr+感染B和B/2菌株，产生透明小斑。 2．杂交试验 双重感染分析子代噬菌体中重组型的频率。;1. 转化（transformation）：裸露的非病毒的DNA导入细菌细胞的过程。 2. 转染（transfection）：裸露的病毒（噬菌体）DNA导入细菌的过程。是一种特殊的转化形式。 3. 转导（transduction）：以噬菌体为媒介将细菌的DNA从供体菌转移到受体菌的过程。 4. 接合（conjugation）：细菌通过细胞之间的直接接触的方式传递遗传物质的过程。;通过接合作用，部分供体基因组DNA转移到受体菌中;1. 单方向转移 2. 都产生部分二倍体 3. 转入的基因只有整合到环状染色体上才能稳定遗传;三、细菌的转化（transformation）;2. 转化的类型;3. 转化的过程;; b）DNA通过细胞壁和细胞膜是一个主动运输过程，需要膜上的转运分子，并消耗能量。;外源DNA穿入受体细胞示意图;（3）联会(synapsis)，与外源DNA片段的整合 ;部分二倍体发生交换只有偶数（双交换、四交换）交换才有意义，既不破坏受体DNA的环状结构，又将外源DNA置换到受体染色体中。而奇数交换将受体环状DNA打开成线性DNA，重组转化子不能成活。 ; 经过一次染色体复制和细胞分裂，形成一个转化了的细胞和一个未被转化的细胞。;细菌转化的过程;4. 转化作图 ; 用一野生型细菌菌株提取出来的DNA转化一个不能合成丙氨酸（ala－）、脯氨酸（pro－）、精氨酸（arg－）的突变菌株，获得下列结果： ala+ pro+ arg+ 8400 ala+ pro－ arg+ 2100 ala+ pro－ arg－ 840 ala+ pro+ arg－ 420 ala－ pro+ arg+ 1400 ala－ pro－ arg+ 840 ala－ pro+ arg－ 840 ;任意两基因发生共同转化的前提下：;重组率＝重组型转化子/转化子总数×100％ ala－pro间的重组率＝ (2100+840+1400+840)/(2100+840+1400+840+8400+420) ＝37％ ala－arg间的重组率＝ (840+420+1400+840)/ (840+420+1400+840+8400+2100) ＝25％ pro－arg间的重组率＝ (2100+420+840+840)/(2100+420+840+840+8400+1400) ＝30% 所以，三基因间的距离和顺序为： ala←25→arg←30→pro ;四、细菌的接合（conjugation）; 1. Lederberg-Tatum实验 Lederberg发明的用基本培养基（minimal medium）筛选原养型（prototroph）方法。;实验解释：基因突变；营养物质互补；遗传物质重组？;对实验结果的解释;对Lederberg-Tatum实验解释的质疑 ;;Hayes（海斯）实验;实验推论;结论:;Hayes等对“雄性”细菌和“雌性”细菌的解释;F因子的实质;大肠杆菌的接合过程（F+×F- ）：F因子的转移频率高，而细菌DNA转移频率极低。;3. 高频重组菌株（Hfr）;高频重组与F因子的关系;;1.两细胞接触，供体性伞毛形成接合管，整合的F因子产生缺口。单链通过接合管转移到受体细胞（F因子的转移原点及