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分子生物学技术和食源性
致病菌的快速检测
;与细菌有关的一些分子生物学和
细胞生物学技术;
PCR技术;
荧光PCR技术;
相关的一些分子生物学技术在食源性致病菌
的快速检测技术中的应用;
5. 一实例分析个案
;与细菌有关的一些分子生物学和
细胞生物学技术;核酸的抽提与纯化
; PCR-聚合酶链式反应
(Polymerase Chain Reaction, PCR);PCR一般过程:
1.变性(denaturation): 加热使DNA双螺旋的氢
键断裂,双链解离形成单
链DNA。
2.退火(annealling???: 温度降低时使引物和其
互补的模板在局部形成
杂交链。
3.延伸(extension): 在DNA聚合酶和4种脱
氧核糖核苷酸及Mg2+存在
的条件下,催化DNA链延
伸反应。
; 模板DNA 或RNA
一对寡核苷酸引物
4种脱氧核糖核苷酸(dNTPs)
热稳定的聚合酶(Taq);
Mg+缓冲液。;凝胶电泳:经溴化乙锭染色,在紫外照射下可见橙红色的特异DNA扩增带并可以在图象成像仪下成像。;;荧光PCR技术(Real Time PCR);荧光PCR技术(Real Time PCR);荧光PCR技术(Real Time PCR);荧光PCR技术(Real Time PCR);荧光PCR技术(Real Time PCR);FRET Probes;荧光PCR技术(Real Time PCR);荧光PCR技术(Real Time PCR);多重荧光PCR技术;限制性内切酶和酶切技术及重组;GFP-MIP重组结构;GFP-MIP重组结构;Southern blotting和Northern blotting技术;芯片技术;芯片技术;芯片技术;DNA序列分析;DNA序列分析;DNA序列分析(I);DNA序列分析(II);DNA序列分析(III);Western blotting技术;胶体金检验法;细胞培养技术;MTT Assay;MTT Assay;有关的一些分子生物学技术在食源性致病菌的快速检测技术中的应用;霍乱CtxA基因的PCR;霍乱CtxA基因的PCR;霍乱CtxA基因的PCR; 1 gaattcccgg gttgtgggaa tgctccaaga tcatcgatga gtaatacttg cgatgaaaaa
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