双缩脲测定蛋白质的含量.pptVIP

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2019-12-23 发布于湖北
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双缩脲测定蛋白质的含量.ppt

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双缩脲测定蛋白质的含量实验原理实验器材实验试剂实验步骤实验原理双缩脲在碱性溶液中与Cu2+产生紫色的络合物,这一反应称“双缩脲反应”。蛋白质分子中肽键，也能与Cu2+ 发生双缩脲反应，溶液紫色的深浅与蛋白质含量在一定范围内成正比，而与蛋白质的氨基酸组成及分子量无关。该紫色的络合物在580nm处有最大吸收值，通过测定580nm处的吸光值用于谷物蛋白质含量的测定。实验器材 1．分光光度计 2．分析天平 3．移液管 4．具塞三角瓶 5．漏斗 6 ．三角瓶实验试剂 1．10%KOH溶液 2．无水乙醇 3．碳酸铜 4．酪蛋 5．豆粉实验步骤 (一)标准曲线的绘制按下表加入各试剂，振荡10min，静置片刻，将上清过滤后580nm测定吸光值。以吸光值为横坐标,酪蛋白含量为纵坐标,绘制标准曲线。 (二)样品的测定结果计算：标准曲线上查得蛋白质含量（g）样品蛋白质含量（%）= ×100 豆粉（g） * * 内蒙古农业大学生物化学与分子生物学实验教学中心制作人：王瑞刚 OD580 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20 10%KOH（ml） 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20 无水乙醇（ml） 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1. 碳酸铜（g） 0.13 0.12 0.11 0.10 0.09 0.08 0.07 0.06 0.05 0 酪蛋白（g） 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 编号 OD580 振荡10min，静置片刻，将上清过滤后580nm测定吸光值 20.00 20.00 20 10%KOH（ml） 20.00 20.00 20 无水乙醇（ml） 1.00 1.00 1.00 碳酸铜（g） 0.1000 0.1000 0 豆粉（g） 3 2 1 编号