抗生素效价微生物检定法.pptVIP

（六）记录与计算 　1. 试验记录 应包括抗生素的品种、剂型、标示量、生产厂、批号、检查目的、检验依据、检验日期、温度、湿度，标准品与供试品的称量、稀释步骤与核对人，抑菌圈测量结果。当用游标卡尺测量抑菌圈直径时，应将测试数据以框图方式顺双碟数记录。当用测量仪测量面积或直径时，应将电脑测试、计算、统计分析的打印纸贴附于记录中。 　2. 计算 见本章第四节。 （七）结果判断 　1.　可靠性测验　当用卡尺测量后的结果，将参数输入电脑，用专用（2.2）法和（3.3）法的软件程序（本书附有统计软件光盘）进行统计学处理。如用测量仪测量抑菌圈时，测量与统计学处理一次完成，统计学分析按《中国药典》生物测定统计规定进行可靠性测量。（2.2）法要求直线回归、剂间P0.01，偏离平行P0.05；（3.3）法除（2.2）的规定外，尚考查二次曲线和反二次曲线P0.05，试验结果认为可靠，方可进行效价和可信限率计算。 　2.可信限率　考核实验的精密度，除药典各论另有规定外，本法的可信限率不得超过5%。上述各项规定都能符合者，试验结果成立。 　3. 实验计算　所得效价低于估计效价的90%或高于估计效价的110%，则检验结果仅作为初试，应调整供试品估计效价，予以重试。 　4. 效价测定　一般需双份样品，平行实验以便核对。对不符合规定的样品应至少有2次符合规定的结果，才能发出报告。 第五节　二剂量法的误差分析 　　通过对试验结果的统计分析和可信限及可信限率的计算，来判断试验结果是否可靠或是否需要复试。《中国药典》规定对抗生素的效价测定结果，都要进行有关的误差分析。下面以某批红霉素的效价测定为例，进行效价计算、误差分析、可信限率计算。 第六节 供试品测定操作 一、原料药品 　　是指大包装或半成品干燥粉末或结晶性粉末，不含辅料，一般测定纯度（U/mg），根据抗生素品种及厂方提供的效价进行估计单位，称取样品，估计效价尽量接近真实效价，如估计效价与真实效价距离较远时，可先作初测试验，按初测结果来估计效价，再作精密测定。原料药品一般皆以干燥品计算效价，先测其含水的供试品效价，再根据供试品的水分或干燥失重的结果折算成干燥品的效价。 　　干燥品效价（U/mg）=含水效价（U/mg）/（1-供试品水分含量%）　 二、制剂的测定 1. 粉针剂　　指注射用灭菌粉末，用小瓶橡皮塞铝盖分装或熔封在安瓶内，均须测定整瓶效价及纯度（U/mg）。取装量差异项下的内容物，称出适量（50mg以上）至称量瓶内，按估计效价进行溶解、稀释，测出每1mg的单位数，再根据装量差异项下的每瓶平均重量计算出整瓶的效价。 2. 水针剂　　水针剂系抗生素无菌水溶液，标示量以每毫升含效价单位数计，效价测定时启开安瓶或小瓶盖后，用干燥的标准吸管吸取一定量供试品，将吸管外壁用滤纸擦净，再弃去过多的供试品，沿着容量瓶口内壁缓缓放入已盛有一定溶剂的容量瓶内，以免抗生素结晶析出，振摇，继续加溶液至刻度，摇匀，再稀释至规定的浓度。 　3. 片剂　分为素片、糖衣片和肠衣片。素片 称取20片的总量，求出平均片重，研细混合均匀后，精密称出适量（约相当1片的重量）至称量瓶中，然后根据每片的标示量，用规定的溶剂溶解，稀释至容量瓶中。注意之点：研磨时要注意环境干燥，可在干燥操作柜内操作，研磨要迅速，避免吸水，因片剂内含赋形剂较多，如稀释时赋形剂浮于溶液表面，量取体积时应读取赋形剂层下的溶液度，如沉淀较多，应待其下沉后量取其悬浮液，有些片剂辅料吸附抗生素，需加注意。 　　为节约供试品，可与片剂的重量差异检查结合进行。糖衣片、肠衣片 取规定的供试品数片，放于玻璃乳钵中，研细并根据标示量及规定的溶剂边研磨边溶解，移置于放有小漏斗的容量瓶中，稀释至刻度、摇匀、静置，使赋形剂下沉而抗生素已溶解在溶液内，精密吸取容量瓶中的悬浮液适量，作进一步稀释。 　4. 胶囊剂　取装量差异试验后的内容物，混合均匀，精密称出约相当平均1个胶囊的量，注意研细，按规定的溶剂溶解并移置至所需的容量瓶内，稀释至刻度，摇匀，如供试品中含较多的辅料，照糖衣片项下方法进行。 　5. 软膏剂或眼膏剂　将软膏剂或眼膏剂软管的封口切开，擦净管的外壁，置于干燥器内约1 h，取干燥的分液漏斗，将膏剂软管在天平上称重，带手套取出软管将膏剂挤入洁净的分液漏斗内，约2g，再称其膏剂软管的重量，前后称量之差即为分液漏斗内膏剂供试品的重量，溶解膏剂的溶剂可用不含过氧化物的乙醚或石油醚，并且所提取的抗生素应不溶于或微溶于该有机溶剂中，以避免提取过程中抗生素的损失。按规定量加提取溶剂至分液漏斗中，振摇，使基质溶解后，用规定的缓冲溶液使抗生素被提到水相溶液中，用缓冲溶液提取3次，合并3次提取液，置所需的容量瓶内，加缓冲溶液至刻度，摇匀，再稀释至规定的浓度。 标准品的称量 标准品 返回