气相色谱法测定饮料中苯甲酸和山梨酸的含量.pptVIP

*/15 在线答疑：yanjie0001@126.com liaolw@163.com 大 学 通 用 化 学 实 验 技 术 气相色谱法测定饮料中苯甲酸和山梨酸的含量 实验100 气相色谱法测定饮料中苯甲酸和山梨酸的含量 100.1 实验目的 (1) 掌握气相色谱外标法定量分析的方法。 (2) 初步了解气相色谱仪的使用。 100.2 实验原理 本实验在酸性条件下，将样品中的山梨酸和苯甲酸用乙醚提取出来，经浓缩、蒸干后，再溶于挥发性较小的乙醇中，成为可供测定的提取液。 用氮气为载气，在涂布5% DEGS + 1% H3P04固定液的Chromosorb W.AW色谱柱中，提取液中的山梨酸和苯甲酸被完全分离，用氢火焰离子化检测器(FID)检测，可得尖锐的窄形峰。测量各峰的峰高，并与标准曲线比较，便可同时测出样品中苯甲酸和山梨酸的含量。 这种利用标准曲线定量的方法在色谱分析中称为外标法。其优点是：制成工作曲线后，测量工作很简单，也不必求出定量校正因子f。但此法要求各次进样严格相等，操作条件严格不变，难度较大。所以这种方法多用于批量液体样品的常规控制分析或气体样品的分析。 100.3 操作流程 1.色谱仪的操作流程 与实验98相同。 2．山梨酸标准溶液的配制 (1)山梨酸标准储备液。准确称取0.2000 g山梨酸于小烧杯中，用少量3︰1 (体积比，下同)的石油醚-乙醇混合液溶解后，移入100 mL容量瓶，用3︰1的石油醚-乙醇定容。此溶液含山梨酸2.0 mg·mL-1。 (2) 山梨酸标准溶液系列。取5个10 mL容量瓶，分别加入2.0 mg·mL-1山梨酸标准储备液0.30 mL，0.50 mL，0.80 mL，1.00 mL，1.20 mL，再用3︰1的石油醚-乙醇稀释到刻度，摇匀。 2．苯甲酸标准溶液的配制 (1)苯甲酸标准储备液。准确称取0.2000 g苯甲酸于小烧杯中，用少量3︰1的石油醚-乙醇溶解后定容于100 mL容量瓶。此溶液含苯甲酸2.0 mg·mL-1。 (2)苯甲酸标准溶液系列。取5个10 mL容量瓶，依次加入2.0 mg·mL-1苯甲酸标准储备液0.30 mL，0.50 mL，0.80 mL，1.00 mL，1.20 mL，再用3︰l的石油醚-乙醇稀释到刻度，摇匀。 3．样品溶液的配制 吸取2.50 mL混合均匀的试样于25 mL带塞的量筒中，加0.5 mL 6mol·L-1 HCl酸化，分别用15 mL和10 mL乙醚各提取1次，每次振摇1min，将上层醚液合并于50 mL分液漏斗中。用6 mL 4％ HCl酸性溶液分2次洗涤醚液，弃去水层。将醚液通过小漏斗中的无水Na2S04。过滤于25 mL容量瓶中，加乙醚到刻度，摇匀。准确吸取上述乙醚提取液5.00 mL于5 mL带塞试管中，置于40～50 ℃的水浴上蒸干，加入2.00 mL 3︰1的石油醚-乙醇混合溶剂，使残渣溶解，盖好备用。 4．测定 色谱条件——载气：N2 50 mL·min-1；燃气：H2 40 mL·min-1；助燃气：空气300 mL·min-1；温度：汽化室230 ℃，检测器230 ℃，柱温17 ℃；纸速：5 cm·min-1。 (1) 启动仪器并按上述参数调好仪器，点燃氢火焰，待基线稳定后进样。 (2) 将前面配制的山梨酸标准溶液系列、苯甲酸标准溶液系列、试样溶液各进样2 μL于气相色谱仪中，记录色谱图。 100.4 实验结果 编 号 1 2 3 4 5 山梨酸 2.0 mg·mL-1标液体积/mL 0.30 0.50 0.80 1.00 1.20 定容体积/mL 10.00 10.00 10.00 10..00 10.00 含量/(mg·mL-1) 色谱峰高/cm 苯甲酸 2.0 mg·mL-1标液体积/mL 0.30 0.50 0.80 1.00 1.20 定容体积/mL 10.00 10.00 10.00 10.00 10.00 含量/(mg·mL-1) 色谱峰高/cm (1) 测量色谱图中各色谱峰的峰高并填写下表 (2) 在方格坐标纸上，以组成量度为横坐标，以峰高为纵坐标，绘制山梨酸和苯甲酸的标准曲线。 (3) 根据标准曲线和试样溶液的峰高，查出样品溶液中山梨酸和苯甲酸的含量。饮料试样中山梨酸或苯甲酸的含量ρ(g·mL-1)按下式计算： 式中：ρ0为从标准曲线上查得样品溶液中山梨酸或苯甲酸的组成量度(mg·mL-1)；V1为所取饮料试样的量(mL)；5.00为配制样品溶液时所取乙醚提取液的体积(mL)；25.00为试样乙醚提取液的定容体积(mL)；V2为配制样品溶液时加入3︰1的石油醚-乙醇混