TS-VD-538-01参苓白术散-微生物限度检查方法.docVIP

非无菌产品微生物限度 检查方法适用性试验文件 文件名称 参苓白术散 微生物限度检查方法适用性试验（2015版） 文件编号 TS-VD-538-01 重庆天致药业股份有限公司 2018年  参苓白术散 微生物限度检查方法适用性试验方案 试验报告的起草： 日期： 试验报告的审核： 日期： 试验报告的审核： 日期： 试验报告的批准： 日期： 1.概述: 通过试验以确认所采用的方法适合于该药品的需氧菌、霉菌和酵母菌的测定，确认所采用的方法适合于该药品的控制菌的检查，根据样品的特性制定检验方法和检验条件，按制定的方法进行试验，根据试验结果判断是否符合试验标准。若符合，按试验的方法和条件进行药品的微生物限度检查；若不符合，重新建立制订检验方法和检验条件，再进行试验，直至试验结果符合设立的试验标准。 2.目的:确认所采用的方法适合该药品的需氧菌、霉菌和酵母菌、控制菌的测定。照此检查法和检验条件进行供试品需氧菌、霉菌和酵母菌、控制菌检查能保证检验结果的准确、可靠。 3.职责 3.1.QC：负责起草试验方案和报告，并负责本方案的实施。 3.2.QC主管、质量部长：负责试验方案、试验报告的审核。 3.3.质量授权人：负责方案、偏差和报告的最后批准。 4.适用范围:适用于本公司生产的参苓白术散 微生物限度检查：微生物计数法和控制菌检查法。 5.培训:在本方案实施前，已对方案实施过程中涉及人员进行培训，以保证方案顺利实施，并做好培训记录，培训记录见附表1。 6.试验条件 6.1.供试品 规格： 批号： 6.2.培养基及试剂 培养基名称 培养基批号 生产厂家 6.3.试验用菌株 菌种名称 菌种编号 菌种来源 6.4.检验仪器及相关设备 仪器名称 仪器型号 仪器厂家 7.计数方法适用性试验 7.1.需氧菌总数及霉菌和酵母菌计数方法适用性试验 7.1.1菌液制备 7.1.1.1接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、沙门菌的新鲜培养物至100ml胰酪大豆胨液体培养基中，置30～35℃培养18～24小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，制成适宜浓度的菌悬液，备用。 7.1.1.2.接种白色念珠菌的新鲜培养物至100ml沙氏葡萄糖液体培养基中，20～25℃培养18～24小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，制成适宜浓度的菌悬液，备用。 7.1.1.3.接种黑曲霉的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基上，20～25℃培养5～7天，加3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9％无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，取1ml菌液加0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，制成适宜浓度的菌悬液，备用。 7.1.2.试验操作方法 试验分3组，进行3次独立的平行试验。 7.1.2.1.供试液的制备 取供试品10g，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，振摇使溶解，作为1:10供试液。 7.1.2.2.试验组： 取上述制备好的供试液，加入铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉试验菌悬液，混匀，使每1ml供试液中含菌量不大于100cfu。取1ml分别注入平皿中，倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平板，待凝固后，30～35℃培养三天，白色念珠菌、黑曲霉30～35℃培养五天，计数；取上述制备好的供试液，加入白色念珠菌、黑曲霉菌悬液，混匀，使每1ml供试液中含菌量不大于100cfu，取1ml分别倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平板，待凝固后，20～25℃培养五天，计数。 7.1.2.3.供试品对照组： 取供试液100ml，加入PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液1ml，混匀。 7.1.2.4.菌液对照组 取各试验菌液1ml，分别加入PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，混匀，使每1ml供试液中菌落数不大于100cfu，每株试验菌平行制备2个平板，置规定温度培养。 7.1.2.5. 试验组 试验可接受标准：试验组菌落数减去供试品对照组菌落的值与菌液对照组菌落数的比值应在0.5-2.0范围内。 7.1.2.8.测定结果： 阳性菌 次数 活菌组菌数（cfu/ml) 试验组菌数（cfu/ml) 供试液对照菌数（cfu/ml) 比值