生化核酸结构和功能.pptVIP

* * * * * * * * * * * * 紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称熔解温度(melting temperature, Tm)。 影响Tm值的因素： 1．DNA的均一性 2．G-C碱基对含量 3．介质中的离子强度 * 三、DNA的复性与分子杂交 DNA复性(renaturation) 在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 。 * 在DNA复性过程中，如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，在适宜的条件（温度及离子强度）下，就可以在不同的分子间形成杂化双链。 这种现象称为核酸分子杂交。 核酸分子杂交(hybridization) * DNA-DNA 杂交双链分子 不同来源的DNA分子 * * 第5节 核酸的分离与纯化 Isolation and Purification of Nucleic Acid * 一、核酸分离与纯化的一般原则 操作中要注意： 1.采用温和的条件 2.防止过酸、过碱、 3.避免剧烈搅拌等 4.抑制核酸酶的活性 5.防止核酸分子被降解和变性 原则：防止核酸的降解和变性，要尽量保持其在生物体内的天然状态。 * 二、核酸的分离与纯化 酚抽提法 凝胶