分子发光荧光和磷光知识点.pptVIP

在紫外光照射下会发生荧光的无机化合物很少，主要依赖于有机试剂形成的螯合物。 三. 荧光分析的应用 1. 无机化合物 直接荧光测定法 其中，较常测定的元素有：Be、Al、B、Ga、Se、Mg、Zn、Cd与某些稀土元素；测定的灵敏度有些可以达到10-10; 某些元素虽然不与有机试剂形成发荧光的配合物，但是它会与发荧光的配合物争夺配位体，组成不发荧光的配合，使其产生荧光熄灭，由荧光熄灭的强度此该元素的含量。 较常测定的元素有：F、S、Fe、Ag、Co、Ni、Cu、Mo、W 荧光熄灭测定法 自从1867年Goppelsroder进行了历史上首次的荧光分析工作，应用铝—桑色素配合物的荧光进行铝的测定以来，采用有机试剂可以测定70多种元素。 催化荧光测定法 较常测定的元素有：Cr、Nb、U、Te、Pb 某些元素虽然与有机试剂形成发荧光的配合物，但是反应速度慢，在某些微量元素的催化下，反应速度会加快，在特定的时间内可用来测定微量元素。 低温荧光测定法 常测定的元素有：Cu、Be、Fe、Co、Os、Ag、Au、Zn、Al、Ti、V、Mn、Er、H2O2、CN 某些微量元素存在，会催化发荧光的配合物产生荧光熄灭，在特定的时间内可用来测定微量元素。 溶液温度的降低，显著增强溶液的荧光强度。液氮 －1960C 较常测定的元素有：Ce、Sm、Tb 等稀土元素 　　　　　　　　　Sb、V、Pb、Bi、Nb、Mn 固体荧光测定法 固体荧光发在荧光分析中也经常用到。 芳香族化合物存在共轭的不饱和体系，是有机化合物荧光测定的主要类型。 ２. 有机化合物 待测物 试剂 λ exmax λemmax 测定范围 ppm 丙三醇 苯胺 紫外 蓝色 0.1~2 糠　醛 蒽酮 465 505 1.5~15 氨基酸 氧化酶 315 425 0.01~50 维生素A 无水乙醇 345 490 0~20 蛋白质 曙红丫 紫外 540 0.06~6 肾上腺素 乙二胺 420 525 0.001~0.02 青霉素 α-甲氧基-６-氯-９-(β-氨乙基)-氨基氮杂蒽 420 500 0.0625~0.625 玻璃酸梅 3-乙酰氧基吲哚 395 470 0.001~0.033 胍基丁胺 邻苯二醛 365 470 0.05~5 四氧嘧啶 苯二胺 365 485 10-4 3. 生命与生物物质 紫外-可见分光光度计测量池(吸收池) 荧光分光光度计 样品池 I0 It I0 It IF,p Modern Instrument Analytical Method 分子荧光:Fluorescence 分子磷光:Phosphorescence §1.1 分子发光的基本原理 第一次记录荧光现象的是16世纪西班牙的内科医生和植物学家N.Monardes，1575年他提到在含有一种称为“Lignum Nephriticum”的木头切片的水溶液中，呈现了极为可爱的天蓝色。 直到1852年，Stokes在考察奎宁和叶绿素的荧光时，用分光光度计观察到其荧光的波长比入射光的波长稍微长些，才判断这种现象是这些物质在吸收光能后重新发射不同波长的光，而不是由光的漫射作用所引起的，从而导入了荧光是光发射的概念，他还由发荧光的矿石“萤石”推演而提出“荧光”这一术语。 1867年，Goppelsroder进行了历史上首次的荧光分析工作，应用铝—桑色素配合物的荧光进行铝的测定。 19世纪以前，荧光的观察是靠肉眼进行的，直到1928年，才由Jette和West提出了第一台荧光计。 一. 分子荧光与磷光的产生 1. 单重态与三重态 2. 分子的活化与去活化 3.分子发光的类型 按激发的模式分类： 按分子激发态的类型分类： 光致发光 化学发光/生物发光 热致发光 场致发光 摩擦发光 分子发光 分子发光 荧光 磷光 瞬时荧光 迟滞荧光 按光子能量分类： 斯托克斯荧光(Stokes)： λex λem 反斯托克斯荧光 (Antistokes)：λex λem 共振荧光(Resonance)： λex = λem 荧光 分子的活化与去活化 S0 S1 T1 S2 紫外可见吸收 光谱 外转移 紫外可见共振荧光 光谱 内转移 荧光 系间窜跃 磷光 反系间窜跃 迟滞荧光 振动弛豫 ２. 无辐射跃迁的类型 振动弛豫: Vr 10-12sec 外 转 移:无辐射跃迁回到基态 内 转 移:S2~S1能级之间有重叠 系间窜跃: S2~T1能级之间有重叠 反系间窜跃:由外部获取能量后 T1 ~ S2 １. 辐射跃迁的类型 共振荧光：10-12 sec 荧 光：10-8 sec 磷 光：1~10-4 sec