发酵条件及过程控制.ppt

第六章 发酵条件及过程控制 微生物代谢是一个复杂的系统，它的代谢呈网络形式，比如糖代谢产生的中间物可能用作合成菌体的前体，可能用作合成产物的前体，也可能合成副产物，而这些前体有可能流向不同的反应方向，环境条件的差异会引发代谢朝不同的方向进行。 因此对发酵过程的了解不能机械的，割裂的去认识，而要从细胞代谢水平和反应工程水平全面的认识 微生物的生长与产物合成有密切相关性，不仅表现在菌体量的大小影响产物量的多少，而且菌体生长正常与否，即前期的代谢直接影响中后期代谢的正常与否。特别是对于次级代谢产物的合成更具有复杂性 发酵工艺控制的基础 了解产生菌生长、发育及代谢情况及动力学模拟 了解生物、物理、化学和工程的环境条件对发酵过程的影响 如何进行控制 测定各种参数 依据参数变化，并通过动力学关系获得发酵过程的各项最佳参数 物理参数 化学参数 生物参数 间接状态参数 μ qP qS qo2 (OUR) CER(Co2释放速率) RQ(呼吸商: CER/ OUR) Yxs Yps Kla 等 第一节 营养基质和菌体浓度的影响及其控制 种类：葡萄糖 优点： 吸收快，利用快，能迅速参加代谢合成菌体和产生能量 缺点： 有些品种产生分解产物 阻遏效应。 （二）、碳源浓度的影响 在发酵过程中，补加糖类控制碳源浓度 残糖量 pH值 Qc X 粘度 溶氧 尾气中O2和CO2的含量 发酵液的总体积 补糖量的控制——经验法 根据经验，以最高产量的罐批的加糖率为指标，并依据菌体浓度、一定时间内的糖比消耗速率和残糖等加以修正。 例：青霉素发酵开始补糖在残糖降至1.5%, pH开始回升时补糖。补糖量以最高罐批经验量为参考。 每小时 前期0—40h 中期40—90h 后期90以后 加糖量 0.08%-0.15% 0.15% - 0.18% 0.15% -0.18% 补糖量的控制——动力学方法 依据μ、 qP 、 qC等动力学参数 之间的关系，计算加糖量 二、氮源的种类和浓度的影响及控制 种类：氨水、铵盐和玉米浆 优点： 易被菌体利用，明显促进菌体生长 缺点： 对于有些品种高浓度的铵离子抑制产物合成 （二）氮源的浓度对发酵的影响及控制 补氮的依据：残氮量、pH值、菌体量 补氮量的控制 经验法： 依据使pH升高0.1而通入氨水的量来计算。 依据残氮量和工艺控制残氮量来计算。 例：土霉素发酵50m3发酵罐使pH升高0.1通氨量为10升。使氨基氮上升0.004%-0.005%。 动力学方法： 通过qN、μ、 qP ，计算每小时的补氮量。 三、磷酸盐浓度的影响和控制 （一）磷酸盐源的影响 磷酸盐能明显促进产生菌的生长。（0.32-300mM） 对于次级代谢产物，高浓度的磷酸盐能抑制产物合成。 （10mM以下） （二）磷酸盐浓度的控制 一般在基础培养基中采用适宜浓度。 对于初级代谢产物，磷酸盐浓度采用足量。对于次级代谢产物，磷酸盐浓度采用生长亚适量。 一般磷酸盐采用单消，防止发生沉淀反应使溶磷量达不到最适量。 要控制有机氮源中的磷含量，以防溶磷量超过最适量。 当菌体生长缓慢时，可适当补加适量的磷，促进菌体生长。 四、 菌体浓度的影响及控制 菌体浓度的增加速度（生长速度）与微生物的种类和自身的遗传特性有关 菌体浓度的增加速度（生长速度）与营养基质的种类和浓度有关 （ μ 正比于S ） 当存在基质抑制作用时或造成高渗透压时，高浓度营养基质引起生长速率下降。菌体浓度的增加速度（生长速度）受环境条件的影响 以青霉素发酵为例 过高的比生长速率和过高的菌体浓度造成的不利影响 μ过高，S消耗过快，有限的营养基质只能用于生长，而不足于产物合成。 有毒中间产物的快速积累，会改变菌体的代谢途径，抑制产物合成。 X过高，增加OUR，且发酵液粘度增大，减小OTR。CL减小，抑制菌体生长和产物合成。 生长速度和菌体浓度的控制方法 确定基础培养基的适当配比，防止培养基过于丰富或过于稀薄。 通过调节中间补料的速度和量来控制。 第二节 温度的影响及其控制 温度对发酵的影响 一 影响发酵温度变化的因素： 二、发酵最适温度选择 第三节 pH的影响及控制 二、影响发酵pH变化的因素： 1、pH的变化决定于所用的生产菌： 2、培养基中营养物质的代谢引起pH的变化： 培养基pH在发酵过程中能被菌体代谢所改变。若阴离子氮源被利用后产生NH3 ，则pH上升；有机酸的积累，使pH下降。 一般来说，高碳源培养基倾向于向酸性pH转移，高氮源培养基倾向于向碱性pH转移，这都跟碳氮比直接有关。 生理酸性物质和生理碱性物质的消耗 三、最适pH的选择 根据不同菌种的生理特性，确定不同的最适pH 同一菌种根据不同阶