气相色谱及与质谱联用(风味化学).pptVIP

食品风味化学现代分析技术简介 气质联用分析法 顶空固相萃取技术 HS-GC/MS在风味化学研究中的应用 分流/不分流进样 分流(split) 允许样品中的代表部分进入到色谱柱中。 当被测物浓度较高时。 不分流(splitless) 类似于直接进样. 样品中绝大部分进入到色谱柱中。 分流 均匀气化的样品通过分流点(柱尖端Colomn tip). 样品在玻璃衬管气化 要求： 将样品中具有代表性的样品注入到色谱柱中。 可重现的分流比 缺点 可能会有进样歧视现象。对宽沸程的样品易产生非线性分流，使样品失真 不适于高纯度物质和痕量组分(50ppm)的分析 5. 色谱柱 填充柱 - 短(2-3 米), 管内径较粗. 毛细管柱 - 长( 60 米), 内径较细. 所有材料均要求化学及热性质稳定.(柱流失） 热稳定性 - 分析时所使用的温度不应致使色谱柱材质受到破坏 化学稳定性 - 在一定温度下，色谱柱材质不受分析物的影响 注意：用色谱级、干净的材料。 色谱柱参数 柱长、内径、涂膜厚度 色谱柱长度 柱长度只有大的变化才会影响分辨率。 填充柱一般为2-3 米. 毛细管柱可以根据需要进行裁剪。 色谱柱内径 填充柱固定为2 mm。 毛细管柱的内径可从0.10 - 0.8 mm. 内径的大小将影响到色谱柱的效率、保留时间和柱容量. 较小的内径有较小的流失和较小的柱容量 柱容量 柱容量是指色谱峰没有明显变形，样品能够进入到色谱柱中的最大允许量。 以下因素可增加柱容量 : 膜厚 (df). 温度. 内径 (ID). 固定相的选择性. 如果过载，可导致 : 峰变宽. 不对称. 拖尾或前伸峰. 色谱柱中固定相流失 柱流失可以从检测器的背景信号中观察到： 柱流失是由于固定相遭到破坏而导致的。 柱流失随着膜厚、柱内径、长度和温度的增加而增加。 极性柱有较高的柱流失。 柱子损坏或退化，柱流失可能会增加。 避免使用强酸或强碱 按照制造商推荐的温度限制使用 色谱柱老化 确保载气流过毛细管柱15-30分钟. 缓慢程序升温(5o/min)到老化温度。 最初老化温度 ? 4 hours. 如果柱子受到污染, 可在推荐的最高色谱柱温度低20 oC的条件下，老化柱子。 一般推荐的老化温度为： Tcond = Tmax/2 - Tapp/2 + Tapp 这里: Tcond = 老化温度 Tmax = 色谱柱推荐采用的最高温度 Tapp = 应用中使用的最高温度 在老化柱子时，一定不要将毛细管接在检测器上。应将那一端放空，同时将检测器用闷头堵上。如果是FID,容许接在上面，但应该将检测器温度升上去。 温度限制 恒温最高允许温度 :恒温操作的最高允许温度 程序升温最高允许温度：短期允许的最高温度，一般比恒温允许的最高温度高20oC。 当柱子遭受热破坏，可以看到严重的峰拖尾和柱流失。 色谱柱选择 固定相决定了色谱柱的选择性。 有数百种固定相，尤其是填充柱. 许多固定相有多种商品名。 毛细管柱的固定相选择较简单。 “相似相溶原理” - 用极性固定相分析极性物质。 - 用非极性固定相分析非极性物质. 极性表明了分子中电荷的分配情况。 通用型检测器(Universal Detector) 热导检测器（TCD） 气相色谱最早的检测器, 1946. 测量样品气流导热性能的变化。 热导-热量从高温物体到低温物体的传导。 TCD 热导池 两个平行的气流，样品和参考。 惠斯通电桥用来比较两个气流的阻抗。 气流的速度、压力及电的变化影响被最小化。 氢火焰检测器（FID） 最常用的GC 检测器. - 是有机物的通用型检测器。 - 检出限 10 pg. - 线性范围可达7个数量级 . - 容易操作 破坏型检测器－－样品燃烧 信号值大小取决于碳原子数目及替代物的数量。 选择性检测器 电子捕获检测器（ECD） 非破坏性。 对卤素、过氧化物、醌类金属有机物及硝基化合物非常灵敏。 而对胺类、醇类及碳氢化合物不灵敏。 线性窄，－ 103 . 氮磷检测器(TSD） 只对氮、磷有很高的选择性 氮的灵敏度：0.1pg/sec；磷为：0.05pg/sec 主要应用于：药物、燃料、香料、农药残留 TSD的结构类似FID，主要差别是TSD在喷嘴上方有铷珠，氢气流量较小，为维持无火焰条件，一般 10ml/min 气相色谱－质谱联用Gas Chromatography-Mass Spectrometry GC 由保留时间定性 双柱双通道定性 问题 －复杂基体 －未知化合物 扫描模式 全扫描模式（SCAN） 选择性离子扫描模式（SIM) 总结 1、准备工作（仪器、