水稻光温敏核不育系与常规品种的过氧化物酶同工酶比较研究.docVIP

第30卷 第4期2008年12月 延 边 大 学 农 学 学 报Journal of Ag ricultural Science Yanbian U niv ersity V ol.30No.4 Dec.2008 收稿日期:2008-11-03 作者简介:姜军剑(1983 ,男,吉林长春人,延边大学农学院农学系,在读硕士.刘宪虎为通讯作者, T el:0433-*******,E-mail:liuxh@y bu.edu.cn 水稻光温敏核不育系与常规品种的过氧化物酶同工酶比较研究 姜军剑, 李美善, 许明子, 刘宪虎* (延边大学农学院农学系,吉林龙井133400 摘要:对光温敏核不育系和常规品种在不同生育时期进行过氧化物酶(POD的聚丙烯酰胺同工酶电泳分析.结果表明,二者在不同生育时期的过氧化物酶(POD同工酶酶谱表达上存在明显差异,光温敏核不育系在育性转换的敏感时期出现了特征酶带.关键词:水稻;光温敏核不育系;过氧化物酶;聚丙烯酰胺凝胶电泳 中图分类号:S511 文献标识码:A 文章编号:1004-7999(200804-0270-06 大量实验表明水稻光温敏核不育系育性转换主要受光温影响[1~3] ,育性转换敏感期表 现在幼穗分化雌雄蕊形成期至花粉母细胞形成期[4,5] ,所以叶片中生理生化变化必定和育 性转换有着密切的联系 [6] .试验应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE的分析方法对不同生育 时期(苗期、分蘖期、拔节期、幼穗分化期的水稻光温敏核不育系和常规品种的过氧化物酶同工酶(POD进行比较研究,发现光温敏核不育系的过氧化物酶同工酶的变化规律及特点,为阐明光温敏核不育的生化机理提供参考依据. 1 材料与方法 1.1 材料 不育材料:光温敏核不育系(2007年由吉林省农科院引进. 可育材料:吉玉粳、月亭1号、延大101、延大303、延大304、云光、月亭糯1号、通35、南元.取材时期:苗期、分蘖期、拔节期、幼穗分化期. 样品采集:取材时期分别采集不育材料和可育材料单株主茎的全展叶,重复3次,放入超低温冰箱内保存.1.2 方法 电泳方法 采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳,酶液提取、电泳及染色参照胡能书的方法[7]. 酶带数及电泳迁移率的计算 根据酶谱电泳分离特性划分区带,用字母命名区带,不同区带内各条同工酶谱带按照从阴极到阳极的方向依照所属区带再用数字编号,统计每个品种各自的酶带数,计算各酶带的相对迁移率.相对迁移率的计算公式如下: 酶带迁移率(Rf=酶带迁移距离/溴酚蓝指示剂迁移距离. 第4期姜军剑,等:水稻光温敏核不育系与常规品种的过氧化物酶同工酶比较研究 2 结果与分析 2.1 不育系与常规品种苗期叶片的过氧化物酶(POD同工酶电泳分析 苗期叶片的过氧化物酶(POD同工酶电泳分析结果表明,不育系和常规品种都有6条酶带,所有酶带都呈强带和中强带.第1区(POD-A的谱带数有1条,Rf 最小,为0.12;第2区(POD-B中所有品种都有1条共有的酶带B3,Rf 为0.45,不育系除了有B3这条带之外还有Rf 为0.56的B4酶带和Rf 为0.66的B5酶带,而常规品种除了有B3外,都有Rf 为0.29的B1和Rf 为0.37的B2两条酶带;第3区(POD-C中所有品种都有Rf 为0.84的C1酶带和Rf 为0.91的C2酶带(图1、2,表 1. 图1 不同材料苗期POD 电泳图 图2不同材料苗期POD 电泳模式图 Fig.1 The electrophoretograms of POD for Fig.2 The model electrophoretograms of POD different materials at seedling period for different materials at seedling period 表1 POD 同工酶酶带所属区、酶带数及相对迁移率 Table 1 The isozyme bands classification enzyme bands and relative movement rate of POD 种类Species POD-A 酶带数 En zyme ban ds 相对迁移率 Relative move rate A1POD-B 酶带数 Enzym e bands 相对迁移率Relative move rate B1B2 B3B4B5POD-C 酶带数 Enzym e b ands 相对迁移率 Rel ative move rate C1C2酶带总数T otal enzyme bands 光温敏不育PT GM S 10.1230.450.56 0.66 20.840.916吉玉粳Jiyujing 10.1230.290.370.4520.840.916延