北师大版高中生物必修1：分子与细胞酶的化学本质及作用.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 五、固定化酶 固定化酶又叫固相酶或水不溶酶。 优点 1）稳定； 2）重复使用，可连续化、自动化操作； 3）提纯方便，工艺简单。 不足 固定化酶的制备 制备固定化酶要将酶固定在不溶的支持物上，同时必须防止酶的天然结构和活性受到破坏。 固定化的方法： 1）载体结合法 共价结、离子结合、物理吸附 2）交联法 3）包埋法 格子型包埋、微胶囊行包埋 包埋法 吸附法 共价偶联法 交联法 固定化酶在食品工业中的应用 固定化氨基酰化酶生产L-氨基酸 固定化葡萄糖异构酶生产高果糖浆 固定化乳糖酶产无乳糖牛奶 固定化细胞技术的应用 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * （3）催化部位(Catalytic site): 酶分子中促使底物发生化学变化的部位称为催化部位。 通常将酶的结合部位和催化部位总称为酶的活性部位或活性中心。 结合部位决定酶的专一性， 催化部位决定酶所催化反应的性质。 双重影响 温度升高，酶促反应速度升高；由于酶的本质是蛋白质，温度升高，可引起酶的变性，从而反应速度降低 。 温度对酶促反应的影响 最适温度 (optimum temperature)： 酶促反应速度最快时的环境温度。其不是酶的特征性常数 * 低温的应用 高温的应用 酶 活 性 0.5 1.0 2.0 1.5 0 10 20 30 40 50 60 温度 oC 温度对淀粉酶活性的影响 pH对酶促反应的影响 1.最适pH 2.pH稳定性 表现出酶最大活力的pH值 在一定的pH范围内酶是稳定的 pH对酶作用的影响机制： 　1.环境过酸、过碱使酶变性失活； 　2.影响酶活性基团的解离； 　3.影响底物的解离。 0 酶 活 性 pH pH对某些酶活性的影响 胃蛋白酶 淀粉酶 胆碱酯酶 2 4 6 8 10 酶浓度对酶促反应的影响 在有足够底物和其他条件不变的情况下： v = k [E] 底物浓度对酶促反应的影响 底物浓度对酶反应速度的影响 [S] v Vmax 一级反应 v = k [S] 零级反应 v = k [E] 酶促反应的速度与酶浓度成正比 当底物浓度较低时 反应速度与底物浓度成正比；反应为一级反应。 [S] V Vmax 随着底物浓度的增高 反应速度不再成正比例加速；反应为混合级反应。 [S] V Vmax 当底物浓度高达一定程度 反应速度不再增加，达最大速度；反应为零级反应。 [S] V Vmax （一）米－曼氏方程式 中间产物 酶促反应模式——中间产物学说 E + S k1 k2 k3 ES E + P 底物浓度对酶促反应的影响 ※1913年Michaelis和Menten提出反应速度与底物浓度关系的数学方程式，即米－曼氏方程式，简称米氏方程式(Michaelis equation)。 [S]：底物浓度 V：不同[S]时的反应速度 Vmax：最大反应速度(maximum velocity) Ｋm：米氏常数(Michaelis constant) Ｖ Vmax[S] Km + [S] ＝ ── 米－曼氏方程式推导基于两个假设： E与S形成ES复合物的反应是快速平衡反应，而ES分解为E及P的反应为慢反应，反应速度取决于慢反应即 V＝k3[ES]。 (1) S的总浓度远远大于E的总浓度，因此在反应的初始阶段，S的浓度可认为不变即[S]＝[St]。 当反应速度为最大反应速度一半时 Km值的推导 Km＝[S] ∴Km值等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度，单位是mol/L。 2 ＝ Km + [S] Vmax Vmax[S] Vmax V [S] Km Vmax/2 （二）Km与Vmax的意义 Km值 ① Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。 ② 意义： a) Km是酶的特征性常数之一； b) Km可近似表示酶对底物的亲和力； c) 同一酶对于不同底物有不同的Km值。 底物浓度对酶促反应的影响 Vmax 定义：Vm是酶完全被底物饱和时的反应速度，与酶浓度成正比。 意义：Vmax=K3 [E] 如果酶的总浓度已知，可从Vmax计算 酶的转换数