SN／T 1164.2-2003_牛传染性鼻气管炎微量血清中和试验操作规程.pdfVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 ／ — 犛犖犜１１６４．２ ２００３ 牛传染性鼻气管炎微量血清中和试验 操 作 规 程 　 　 　 ㅤㅤㅤㅤ 犘狉狅狋狅犮狅犾狅犳犿犻犮狉狅狊犲狉狌犿狀犲狌狋狉犪犾犻狕犪狋犻狅狀狋犲狊狋犳狅狉 犻狀犳犲犮狋犻狅狌狊犫狅狏犻狀犲狉犺犻狀狅狋狉犪犮犺犲犻狋犻狊 ２００３０３１７发布 ２００３０９０１实施 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局 发 布 ／ — 犛犖犜１１６４．２ ２００３ 牛传染性鼻气管炎微量血清中和试验 操 作 规 程 　 　 　 １ 范围 　 本标准规定了牛传染性鼻气管炎微量血清中和试验方法。 本标准适用于牛传染性鼻气管炎病毒抗体的检测。 ２ 规范性引用文件 　 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 ／ — 分析实验室用水规格和试验方法 ＧＢＴ６６８２ １９９２ 　 ３ 缩略语 　 下列缩略语适用于本标准。 ㅤㅤㅤㅤ ３．１ 犆犘犈 致细胞病变作用。 ３．２ 犜犆犐犇 ５０ 半数组织培养感染量。 ３．３ 犐犅犚 牛传染性鼻气管炎。 ４ 原理 　 动物受到病毒感染后，体内产生特异性中和抗体，并与相应的病毒粒子呈现特异性结合，从而阻止 病毒对敏感细胞的吸附，或抑制其侵入，使病毒失去感染力。微量血清中和试验是在微量细胞培养板 上，用已知标准病毒株测定未知血清抗体。当相应的抗原抗体发生中和反应后，阻止了已知病毒对敏感 细胞的侵袭，从而细胞不出现病变。 ５ 试剂和材料 　 本标准所用水应符合 ／ — 中一级水的规定。 ５．１ ＧＢＴ６６８２ １９９２ 　 本标准所用溶液配制见附录 。 ５．２ Ａ 　 标准毒株（ ／ 冻干毒或其他标准毒株）和标准阳性、阴性血清（由指定单位提供）。 ５．３ ＩＢＲ ＢａｉｔｈａＮｕ６７ 　 细胞：使用 细胞或三代以内体外培养的未感染 病毒的胎牛肾细胞（ ）、睾丸细胞 ５．４ ＭＤＢＫ ＩＢＲ ＢＫ 　 （ ），细胞浓度约为 ５／ 。 或 细胞的制备：无菌采取初生犊牛肾或睾丸，磨碎或剪碎，再 ＢＴ ３×１０ ｍＬ ＢＫ ＢＴ