SN／T 1165.2-2002_蓝舌病琼脂免疫扩散试验操作规程.pdfVIP

　 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 ／ — 犛犖犜１１６５．２ ２００２ 蓝舌病琼脂免疫扩散试验操作规程 犘狉狅狋狅犮狅犾狅犳犪犪狉犲犾犻犿犿狌狀狅犱犻犳犳狌狊犻狅狀狋犲狊狋犳狅狉犫犾狌犲狋狅狀狌犲 犵 犵 犵 ㅤㅤㅤㅤ ２００２１１２５发布 ２００３０５０１实施 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局 发 布 ／ — 犛犖犜１１６５．２ ２００２ 蓝舌病琼脂免疫扩散试验操作规程 １ 范围 　 本标准规定了蓝舌病琼脂免疫扩散试验操作规程。 本标准适用于动物蓝舌病抗体的检测和诊断。 ２ 规范性引用文件 　 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 ／ — 分析实验室用水规格和试验方法（ ： ） ＧＢＴ６６８２ １９９２ ｅｖＩＳ 　 ｑ ３ 缩略语 　 下列缩略语适用于本标准。 ３．１ ＡＧＩＤＴｅｓｔ：琼脂免疫扩散试验。 　 ３．２ ＢＴ：蓝舌病。 ㅤㅤㅤㅤ 　 ３．３ ＢＴＶ：蓝舌病病毒。 　 ４ 原理 　 抗原和抗体的分子质量一般都在 ５ 以下 ，抗原及其特异性抗体在凝胶中从高浓度区域向低 ２×１０Ｕ 浓度区域扩散时所受阻力很小，基本上呈自由扩散形式。由于不同抗原分子的分子质量、结构、形状和 电荷量不同，因此其扩散系数不同，在凝胶中的扩散速度也就不同。当抗原与相应抗体经扩散后在凝胶 中相遇，形成抗原抗体复合物，若两者在相遇处比例适当，则形成最大的复合物。由于复合物的分子质 量增大，颗粒增大，因而不再继续扩散而产生沉淀，呈现出线状或带状，其形成的线状或带状的“特异性 屏障”称为免疫沉淀线或免疫沉淀带，可根据抗原与阳性血清之间出现这种沉淀带，抗原与被检血清之 间是否出现沉淀带来判定被检血清中是否存在抗体。 ５ 试剂和材料 　 ５．１ 抗原：用从美国国家兽医实验室引进的 ＢＴＶ１７型国际标准毒株，参考该实验室的抗原制备方法 　 制备，为群特异性抗原，适用于各型蓝舌病的检疫，由指定单位提供。 ５．２ 标准阳性血清：用从美国国家兽医实验室引进的蓝舌病国际标准毒株，按常规高免血清制备方法 　 制备，琼脂扩散效价在 １∶８以上，由指定单位提供。 ５．３ 阴性血清：无 ＢＴＶ抗体的血清，由指定单位提供。 　 ５．４ 平皿：普通平皿。 　 ５．５ 微量移液器：普通微量移液器。 　 ５．６ 微量滴头：与移液器配套滴头。 　 ５．７　三角烧瓶：普通可加热三角烧瓶。