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- 2020-04-10 发布于广东
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第一章
1、 Z-DNA的结构特点、存在的条件
Z-DNA:左手螺旋,每个螺圈含有12个碱基对。并只有一个深沟。可能在基因表达的调控屮起作用
活性:B-DNA A-DNA Z-DNA
Z-DNA的结构特点:
核糖磷酸骨架呈字形(Zigzag)走向。
左旋
G的糖井健呈顺式(Syn),使G残基位于分子表面。
分子外形呈波形。
大沟消失,小沟窄而深。
每个螺旋有12 bp。
Z-DNA存在的条件:
高盐:NaCI2mol/L,MgC120.7mol/L
Pu,Py相间排列。
在活细胞中如果m5C,则无需卩票吟■喘喘相间排列,在生理盐水浓度下即可产生Z型。
体内的多胺化合物,如精胺、亚胺及亚精胺和阳离子一样,可和磷酸基团结合,使B-DNA转变为Z-DNA.
某些蛋口质如Z-DNA结合蛋口带有正电荷,可使DNA周围形成局部高盐浓度的微环境。
2、 DNA的超螺旋结构与拓扑异构酶
超螺旋结构仅在闭合DNA中产生,环状或线状
正超螺旋…反向扭转
每圈双螺旋碱基数小于10.5(紧缠)。
负超螺旋一同向扭转
每圈双螺旋碱基数人于10.5(松缠)o
意义:DNA复制、转录的启动具有重要的调控作用。
拓扑界构酶作丿IJ特点:既能切断、又能连接磷酸二酯键
分类:拓扑异构酶I ;拓扑界构酶II
作用机制:
拓扑异构酶I:切断DNA双链屮 股链,使另一-条链通过切口;适当时候封闭切口,DNA变为松弛状态。反应不需
ATPo
拓扑异构酶1【:切断DNA分了两股链,断端通过切口旋转。
利川ATP供能,连接断端,DNA分子进入负超螺旋状态。
3、 核酶的定义、锤头结构、举例
核醜(Ribozyme):是指木质为RNA或以RNA为主含冇蛋白质辅棊的一类具冇催化功能的物质。
锤头结构(hammer-head): 1986 年,Symosn 提出
A区:被切RNA切割位点GUX(X: C、U、A)及其附近序列
B区:僦头区,在空间上必须与A区紧邻,保守序列
(锤头结构可形成第三种“V”形结构、两条互补的RNA相互作用也可以形成锤头结构。)
4、 增色效应、熔点(Tm)、影响复性反应的因索、探针、印迹技术的类别
探针(probe): 一小段用同位素、生物素或荧光染料标记,其末端或全链的序列已知的多聚核廿酸,与固定在NC膜 上的核昔酸结合,判断是否有同源的核酸分子存在。
印迹技术的类别及应用:
(一) DNA印迹技术(Southern blotting):检测目标DNA片段
(二) RNA印迹技术(northern blotting):用于RNA的定性定量分析。
(三) 蛋白质的卬迹分(Western blotting):用丁?蛋白质定性定量及相互作用研究
第二章
1、 核小体 染色体
核小体-?螺线体一超螺线体f染色体
2、 染色体的形态结构
染色单体
主缢痕(初级缢痕;着丝粒区):两个染色单体相连处,染色较浅、向内凹陷成狭小区段的部位。
着丝粒:着丝粒区连结两个染色单体的特殊区段。
动粒(着丝点;着丝盘):是主缢痕处,两染色单体外侧表层部位与纺锤丝接触的。将染色体附着在微管上。
次缢痕(副缢痕;核仁形成区):主缢痕外着色较浅的染色体缢缩区,不能弯Illi,与核仁形成有关。常在短臂出现。 位置相对稳定。可作为鉴定标志么一。
核仁纽织区(NOR):位于染色体次缢痕部位,是rRNA 因活跃转录形成(5srRNA除外),核仁形成冇关。
随体:从次缢痕到短臂末端有-?种圆形或略呈长形的染色体节段。可作为鉴定标志之一。
端粒(telomere):末端特化的着色较深部位。山端粒DNA和端粒结合蛋|il(TBP)组成。富含G的髙度重复的短序列 组成,末端形成t环。
3、 端粒与端粒酶
? 端粒(telomere)作用:
维持染色体的稳定性。防止染色体DNA降解、末端融合和缺失
与细胞寿命有关,起细胞分裂计时辭的作用。端粒的复制要靠具有反转录酶性质的端粒酶來完成。
保证遗传信息的完整复制
指导染色体与核膜相连
端粒酚:含有RNA模板到逆转录酚
端粒酚在大多数正常体细胞中无活性,在永生化细胞和恶性肿瘤细胞中有活性,因此町作为恶性肿瘤标记物。
端粒酶抑制剂可抑制恶性肿瘤细胞的增殖:
核酶/反义核酸
逆转录酶抑制剂
核背酸类似物
4、 中度重复序列与Alu序列家族
中度重复序列(modcmglyrcpeMivc sequence):中度重复序列?般都是不编码的序列,有10至儿千个拷贝,例如rRNA 基因、tRNA基因。目前认为,人部分屮度垂复序列与基因表达的调控有关。
tRNA基因一般分布于基因组中,rRNA基因常集中分布于核仁形成区。
中度重复序列的共同特征是两端冇类似于转座了两端的重复序列,这种现彖十分类似于逆转录病毒的结构。人Alu序 列家族
中度重复序列的特点:
重复单位序列相
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