NEW第五章毒理学实验基础.pptVIP

* 第四节 毒理学实验的统计学基础 * 一、毒理学实验的统计学要点 1.毒理学试验设计的统计学要求 应遵循随机、重复及对照三个原则 每个观察指标应具有代表性，并且是相互独立的 具体涉及剂量水平数目及间隔，每个剂量点的实验单位数，每个实验单位接种及计数的细胞数，对照组的设置 * 2.毒理学试验结果的统计分析 由剂量水平和相应观察值组成的二维关系型数据 毒理学试验处理组与阴性对照组观察值均数的比较 根据实验结果（指标）的变量关系类型是数值变量（计量资料）还是分类变量（计数资料），选用不同的统计分析方法 * IPCS专家组推荐的统计学分析方法 数据类别和统计学要求 统计学方法 1．“有或无”数据： 动物间的比较 个别组的比较 Fisher精确分布检验(不分层的数据) 2×2校正的卡方检验(分层或不分层的数据) 非均匀性 2×K卡方检验(分层或不分层的数据) 与剂量相关的趋势 Armitage检验(分层或不分层的数据) 动物内部比较 个别组的比较 McWemar检验或符号检验 非均匀性 Cochran检验 变量问的相关性 Fisher精确分布检验2X2校正的卡方检验 * 2．分级数据： 动物间的比较 个别组的比较 Mann Whitney u检验 非均匀性 Kruskal—Wallis单向方差检验 与剂量相关的趋势 非参数趋势检验 动物内部的比较 个别组的比较 Wilcoxon配对符号秩和检验 非均匀性 Friedman双向方差分析 与剂量相关的趋势 Page检验 变量间的相关性 Spearman等级相关系数 * 3．连续数据： 动物间的比较 个别组的比较 t检验 非均匀性 单向方差分析 与剂量相关的趋势 线性回归分析 动物内部比较 个别组的比较 配对t检验 非均匀性 双向方差分析 与剂量相关的趋势 线性回归分析 变量间的相关性 各组变量间相关性的变化 Pearson相关系数协方差的分析 变量随时间而变化 用方差分析评估第二个时间与第一个时间的差别 * 二、统计学和生物学意义 在评价毒理学试验的结果时，应综合考虑统计学意义和生物学意义 统计检验的假设是关于总体特征的假设，检验方法是以统计量的抽样分布为根据的，得到的结论是概率性的，不是绝对的肯定或否定，不等同于有或无生物学/毒理学意义 * 评价毒理学试验的结果要解决三个问题 1）是否具有统计学意义 2）是否具有生物学意义（是否具有真实的效应） 3）是否具有毒理学意义（是否是有害效应） * 具有统计学意义是具有生物学意义的必要条件之一，正确利用统计学结果有助于确定实验结果的生物学关联 1）纵向比较：此参数的改变有无剂量-反应关系 2）横向比较：此参数的改变是否伴有其他相关参数的改变 3）与历史性对照比较 * 实验及其结果的观察记录 (1)按照预备实验确定的步骤进行实验； (2)熟练掌握实验方法，用量准确，严肃认真地操作； (3)经分析属于错误操作或不合理的结果应重做实验 (4)仔细、耐心地观察实验过程中出现的现象（结果），并进行思考。 * 通常实验记录的项目和内容为： （1）实验名称、实验日期、实验者； （2）受试对象：动物种类、品系、编号、体重、性别、健康状况、饲料、离体器官名称等； （3）实验药物或试剂：名称、来源（生产厂）、剂型、批号、规格、含量、浓度、给药体积、给药剂量、给药时间、给药间隔、疗程等； （4）实验仪器：主要仪器名称、生产厂、型号、规格等； * * 如果实验只采用较低剂量，如果没有观察到毒性反应，则可能掩盖其本来的毒性 * （1）为了使实验结果具有代表性和可重复性 （2）外源化学物从不同途径染毒实验动物所表现的毒性具有很大的差异，这是犹豫因染毒部位解剖生理特点不同，外源化学物吸收进入血液的速度和量也不同，首先到达的器官和组织液不同 * Frank Effect Level 有直接显著作用剂量 * 毒物的致癌作用——小鼠或大鼠，所选用的品系应是对该类受试物的致癌和毒性作用敏感的 慢性中毒损害实质性脏器研究——小鼠，还应注意动物年龄、体重、性别、生理状态和健康状况 * 一般要求，高剂量组应出现明确的有害作用，或者高剂量组剂量已达到染毒的极限剂量（如大鼠或小鼠灌胃或注射的最大容量） 低剂量组应不出现任何可观察到的有害作用，但低剂量组剂量应当高于人可能的接触剂量，至少等于人可能的接触剂量 中剂量组剂量介于高剂量组和低剂量组之间，应出现轻微的毒性效应 * 急性毒性实验中，先确定LD0 LD100，然后再LD0和LD100确定5个剂量组 * 耳缘剪口、号牌、烙印主要用于大动物的标号，染色是实验室小动物常用的标号方法，抓取演示 * 有些实验动物染毒后血液颜色深红，粘稠，可造成动物眼部采血失败后，将动物脱臼处理，进行心脏采血 * 国际化学品安全规划署