植物次生物质的研究进展.pptVIP

由于许多酶的表达具有组织器官特异性，许多原地上和地下共同参与合成的植物次生代谢物质，无论单独在毛状根还是单独在冠瘿组织中均不能合成。利用毛状根和冠瘿组织具有激素自主性的特点，在同一培养基中进行二者共培养，为某些重要次生物质的生产提供了一条新思路。Mahaga-ekera研究发现颠茄A.bellodona的毛状根与Duboisia hybrid的冠瘿组织共培养时，能使二者单独培养不能产生的莨菪胺合成，其含量显著增加。 3. 转基因再生植物 大多数生产植物次生代谢物的转基因植物是通过根癌农杆菌感染受体材料而获得的。张荫麟报道了利用毛状根和冠瘿瘤在无激素培养基上，光照条件下分化出了转化的再生植株，并选出了1个高产株系。刘伟华诱导出了龙胆的发根农杆菌转化的再生植株，其再生苗根部龙胆苦甙的含量比对照高，且再生植株根系发达，可在不含激素的培养基上快速增殖。 4. 反义RNA(micRNA)技术 反义技术以前主要应用于微生物中，应用于植物以提高植物次生代谢物产量的研究是近年才发展起来的。其根据碱基互补的原理合成生物体内某些特定酶基因序列互补的DNA或RNA。与该酶的mRNA结合，抑制该酶mRNA的翻译，从而抑制或封闭某些基因表达。通过此技术，可将micRNA或micDNA片段导人植物使催化某一分支代谢的关键酶受到抑制或加强，从而使目的代谢产物的产量得以提高。 反义技术用于调节亚麻属的一种植物(linuns favum)发根中内植醇脱氧酶活性抑制了分支代谢中木质素分子的合成，而使抗癌物5一甲氧基鬼臼毒素的含量提高。 植物次生物质对植物的保护作用体现在哪些方面？ 植物细胞培养技术生产次生代谢物的增产策略 如何应用基因工程技术提高药用植物次生物质产量？ 8）β-环糊精包衣法 许多植物细胞培养基本不能改变前体物质以有机相存在的状态，而这种有机态往往导致细胞活力显著降低，很难达到增产的目的。通过在体系中加入一种叫环糊精的物质可以解决此问题。具体来说就是把环糊精作为一种包衣剂改变前体的存在状态，前体被包埋于环糊精的空腔内，环糊精分子的部分官能团则被培养体系中的初生或次生化合物经过取代反应所修饰，这种被修饰的环糊精配合体结合了非极性系统和水溶性系统的优点，比天然状态有更好的溶解性，这样加入培养体系中的前体可被最大限度的利用。 3．毛状根培养技术的应用 后述 4．固定化培养技术 该技术是将细胞固定于载体上在固定化反应器中培养的方法。一般来讲次生代谢物的含量与细胞组织的分化程度成正比,细胞聚集与分化程度越高其含量越高。固定化培养的细胞的聚集化和部分组织化为提高细胞次生代谢物的产量提供了两个条件: （1）固定化细胞的组织化水平越接近整体植株水平，越能以与整体植株相同的方式对环境因子的刺激起反应; （2）通常固定化细胞的生长速度一般低于悬浮培养细胞的生长速度，而许多证据表明，生长速度的降低与次生代谢产物产量的提高之间有相关性，固定化的植物细胞既达到组织化要求又限制了生长，因此提高了次生代谢物质的产量。 要想实现固定化培养必须满足以下先决条件: （1）目的产物的合成与细胞生长属于半偶联或非偶联; （2）细胞的生长要被抑制，即生长缓慢，防止培养体系中基质的衰变，造成对培养进程的破坏; （3）被固定的细胞应保持持久的生活力和生物合成能力; （4）目的产物能从细胞中释放出来而进入介质中。 自1979年 BRODELIUS等首次利用藻酸钙凝胶固定化培养毛地黄和长春花生产次生代谢产物以来，目前已成功固定化了几十种植物细胞。根据载体的不同，可将固定化反应器类型分为胶粒固定化反应器和膜反应器。目前最基本、最普遍采用的方法是包埋法，因为该方法操作相对简单且无毒性。即采用海藻酸钙凝胶固定细胞，除此以外，其它凝胶还有琼脂、琼脂糖、明胶、鱼叉藻聚糖、聚丙烯酰胺等，在气升式反应器、流化床反应器或填充床反应器中进行培养；膜反应器使用的支撑物有中空纤维膜和聚乙烯泡沫等。 5．生物转化研究 （1）培养体系必须有所需要的酶系; （2）底物或前体等原料对培养体系没有毒性; （3）底物能够进入相应的细胞区室内; （4）新物质的合成速率一定要比它本身的新陈代谢快。 利用生物体系产生的酶对外源化合物进行的酶催化反应。为了成功实现生物转化以下先决条件必须要满足: 到目前为止，国内外有一些生物转化规模化的例子，但总体较少。如在食品领域，在固定化葡萄糖异构酶的作用下规模化生产高果糖玉米糖浆；在制药行业，第一个利用生物转化技术规模化生产的物质是在被固定化的盘尼西林酰基转移酶的作用下生产盘尼西林；另外还有甲基毛地黄毒苷的 12β-羟基化转化为甲基地高辛，它是在20L或 300L的细胞悬浮培养体系实现的，研究结果显示在 20L的气升式反应器中葡萄糖含量达到8%时基质中地高辛的转化率达到 80%；此外还有