维生素B的测定研究报告.pptVIP

维生素B1的测定 ——营养0901 徐燕萍 张晶荧 赵莎莎 赵小娟 １. 结构与性质 嘧啶 亚甲基 　 噻唑 　　连成的季铵盐化合物 · 维生素B1，又称硫胺。分子式C12H17ClN4OS。它是人体必需的13种维生素之一，是一种水溶性维生素，属于维生素B族，为无色结晶体，溶于水，在酸性溶液中很稳定，在碱性溶液中不稳定，易被氧化和受热破坏。 测定意义 由于人体不能自行合成维生素B1，必须从食物中摄取。因此，人体需依赖食物提供足够的维生素B1，测定各种食品维生素B1含量多少将对食品营养价值评价十分重要。如果由于食物摄入量不足，或因食物的加工、运输、储存、烹饪不当，使维生素B1受到破坏或损失，都会造成维生素B1的缺乏。因此，食品中的维生素B1测定对指导食品加工、保存、膳食营养配比等都有一定的意义。 来源简介 维生素B1广泛存在于天然食物中，含量较丰富的有：动物内脏(肝、心及肾)、肉类、豆类、花生及精细加工的谷物类。谷物类是我国人民的主食，也是维生素B1的主要来源。但过分去除麸皮与糠，维生素B1损失很多，烹调加碱可使维生素B1损失增高。 维生素B1的测定方法： 分光光度法; HPLC法; 荧光分光光度法等。 分光光度法 分光光度法是将维生素B1生成游离型后，与重氮化试剂对氨基苯乙酮反应，生成紫红色色素，移至二甲苯中测定其浓度。 本法灵敏度差，只适用于食品中维生素B1含量高的试样。 高效液相色谱法 把维生素B1衍生化后导入高效液相色谱仪，经柱分离，通荧光检测器测定。 本法适用于体系复杂的样品，干扰严重时采用此法。 荧光法 这里我们主要介绍荧光法 参考GB/T 5009.84-2003 食品中硫胺素(维生素B1)的测定  方法原理 试样在酸性溶液中加热，提取维生素B1，经蛋白分解酶处理，使维生素B1成为游离型。再经层析柱纯化，去除荧光淬灭物质，同时浓缩，用碱性铁氰化钾溶液将其氧化成硫色素，在紫外线下，硫色素发出荧光，再给定的条件下以及没有其他物质干扰时，此荧光之强度与硫色素量成正比即与溶液中维生素B1量成正比。 操作步骤 1.样品处理 样品采集后用匀浆机打成匀浆于低温冰箱中冷冻保存，用时将其解冻后使用。 2.样品提取 3.净化 a.脱脂棉铺于盐基交换管的交换柱底部，再加约1g活性人造浮石使之达到交换柱的1/3高度。 b.用移液管加入提取液20~60ml。 c.加入约10ml热蒸馏水冲洗交换柱，弃去洗液，重复三次。 d.加入20ml50g/L酸性Kcl,收集此液于25ml刻度试管内。凉至室温，用250g/L酸性Kcl定容至25ml，即为净化液。 做空白试验 重复上述操作，将20ml维生素B1标准使用液加入盐基交换管以代替试样提取液，即得到标准净化液。 4.氧化 将5ml试样净化液分别加入A、B两个反应瓶； 同时将5ml标准净化液分别加入A1、B1两个反应瓶中。 Maizel-Gerson 反应瓶