高中第二讲克隆技术生物一轮复习选修3.2.ppt

类型二　植物组织培养的应用 　(2017·丽水模拟)某科研团队利用植物细胞工程技术,把基因序列已知的抗除草剂(Bar)基因导入原生质体获得抗除草剂大豆。请回答下列相关问题: (1)对于已获得的Bar基因可以用________技术进行扩增。图中的a过程通常使用相同的________酶和DNA连接酶,使目的基因与载体连接形成重组DNA。? (2)成功导入重组DNA的再生细胞经脱分化形成I________,进而生长发育成植株。下列不属于I细胞应具有的特征是________。? A.薄壁细胞　　　　　　 B.细胞质丰富 C.液泡小　　 D.细胞核小 (3)若要判断转基因抗除草剂大豆是否成功,比较简便的检测方法是____________ 。? 【解析】(1)获取的目的基因可采用PCR技术,在体外 进行大量的扩增。图中a是基因工程的核心步骤,即构 建重组质粒,该过程一般用相同的限制性核酸内切酶 切割目的基因和质粒,然后借助DNA连接酶进行连接, 得到重组质粒。(2)再生细胞脱分化后形成的是愈伤 组织,愈伤组织具有薄壁、细胞质丰富、分化程度 小、液泡小而细胞核体积大等特点。(3)若要判断转基因抗除草剂大豆是否成功,比较简便的检测方法是用一定浓度的除草剂喷洒,观察转基因大豆的生长情况。 答案:(1)PCR　限制性核酸内切　(2)愈伤组织　D　(3)用一定浓度的除草剂喷洒,观察转基因大豆的生长情况 【加固训练】 苦荞富含黄酮类化合物等,在降血糖、降血脂等方面功效显著。查尔酮合成酶(CHS)是黄酮类化合物合成的关键酶,如图为将CHS基因导入苦荞,培育高产黄酮苦荞品系示意图。 (1)基因工程的核心是________,过程①中切开质粒的酶是________。 (2)为培育转基因苦荞植物,还可将该植物幼叶消毒后,用________酶混合液处理,获得原生质体。将目的基因导入原生质体,经培养形成愈伤组织,?再通过________得到分散的胚性细胞,发育成胚状体,生长发育后获得该转基因植株。 (3)愈伤组织继代次数过多会丧失细胞全能性的表达能力,下列原因错误的是________(填选项编号)。 A.愈伤组织发生遗传变异 B.愈伤组织不能分散成单细胞 C.愈伤组织中激素平衡发生改变 D.愈伤组织对外源激素敏感性发生改变 【解析】(1)基因工程的核心是形成重组DNA分子。基 因工程中切开质粒的酶是限制性核酸内切酶,限制性 核酸内切酶能识别特定的核苷酸序列并在质粒特定的 切点上切割DNA分子。(2)将植物细胞放入高渗的甘露 醇溶液中,通过纤维素酶和果胶酶处理,即可获得原生 质体。对于获得的愈伤组织,可以直接培养获得植株, 也可以通过液体悬浮培养分散成具有胚性细胞特征的单细胞,通过培养可发育成胚状体进而形成植株。 (3)植物细胞在组织培养过程中,全能性逐渐降低,主要原因有遗传物质发生改变(染色体畸变、细胞核变异等)或生长发育条件发生改变(激素的平衡被打破,对外源生长物质的敏感性发生改变)等。 答案:(1)形成重组DNA分子　限制性核酸内切酶　 (2)纤维素酶和果胶　液体悬浮培养　(3)B 【技法点拨】植物激素在组织培养过程中的重要作用 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。其作用及特点为: (1)在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强趋势。 (2)使用顺序不同,结果不同,具体如下:? 使用顺序 实验结果 先使用生长素,后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂,但细胞不分化 先使用细胞分裂素,后使用生长素 细胞既分裂又分化 同时使用 分化频率提高 (3)用量比例不同,结果也不同: 类型三　动物细胞的培养 　(2017·台州模拟)某研究组开展了将白细胞介素-2 基因转入某动物细胞,并对该动物细胞大规模培养,提 取白细胞介素-2用于制药的研究,请回答下列问题: (1)将白细胞介素-2基因导入动物细胞中常用________法,转基因成功的标志是________。? A.细胞中有白细胞介素-2基因 B.细胞中有白细胞介素-2基因转录出的mRNA C.细胞中有白细胞介素-2 D.细胞中有与合成白细胞介素-2有关的tRNA (2)获得转基因动物细胞后,将转基因动物细胞放入________培养箱中培养,培养时细胞会出现________现象,若细胞数目过多会因细胞密度过大和________,不能生长,此时需进行传代培养,传代培养时需用________处理后再转移到新的培养液中。? (3)若白细胞介素-2不能分泌到细胞外,需对细胞进行________处理,再提取获得白细胞介素-2。? 【解析】(1)转基因动物操作中目的基因常通过显微 注射法导入受体细胞。转基因成功的标志是有目的基 因的产物——白细胞介素-2产生,所以C正确。(2)培 养动物细胞时需将其放在C