高中生物 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具课件 新人教版选修3课件.ppt免费

-*- 专题1 基因工程 1.1　DNA重组技术的基本工具 1.简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。 2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 一 二 一、基因工程的定义 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。 一 二 二、DNA重组技术的基本工具 1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀” (1)主要来源:原核生物。 (2)作用:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 (3)结果:形成DNA片段。限制酶切割DNA分子产生的DNA片段末端有两种形式,即黏性末端和平末端。 2.DNA连接酶——“分子缝合针” (1)作用:将切下的双链DNA片段“缝合”,恢复被限制酶切开的磷酸二酯键,拼接成新的DNA分子。 一 二 一 二 3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” (1)载体的条件 ①能够在受体细胞中自我复制。 ②有一至多个限制酶切割位点,便于外源基因的插入。 ③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。 ④在宿主细胞内友好借居,不影响宿主细胞的生命活动。 ⑤分子大小应合适,以便提取和体外操作。 (2)载体的种类 ①质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外、能够自我复制的小型双链环状DNA分子。含有一个至多个限制酶切割位点,供外源基因插入其中,并带有特殊的标记基因,是基因工程最常用的运载体。 ②λ噬菌体的衍生物 ③动植物病毒 一 二 细胞膜上的载体与基因工程中的载体是否相同? 提示:不相同。①化学本质不同:细胞膜上的载体化学成分是蛋白质;基因工程中的载体可能是结构,如质粒(DNA),也可能是生物,如动植物病毒等。②功能不同:细胞膜上的载体功能是协助细胞膜控制物质进出细胞;基因工程中的载体是一种“分子运输车”,把目的基因导入受体细胞。 一 二 三 四 一、基因工程的概念、原理和理论基础 1.概念 一 二 三 四 2.基因工程的原理和理论基础 (1)原理:基因重组。 (2)理论基础 ①拼接:不同生物DNA分子的基本组成单位相同,都是4种脱氧核苷酸;空间结构相同,都是规则的双螺旋结构。 ②表达:生物界共用一套遗传密码,相同的遗传信息在不同生物体内表达出相同的蛋白质。 一 二 三 四 二、限制性核酸内切酶 1.切割后末端的种类 一 二 三 四 特别提醒(1)当限制酶剪切目的基因一次时,获得的黏性末端或平末端有2个,而不是1个,若剪切目的基因两次,共产生4个黏性末端或平末端。 (2)限制酶切割载体的切割位点并不是任意的,必须保证至少有1个完整的标记基因,以便于检测。 一 二 三 四 2.限制酶和DNA连接酶的关系 (1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。 (2)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 (3)DNA连接酶起作用时,不需要模板。 特别提醒(1)不同DNA分子用同一种限制酶切割形成的黏性末端都相同;同一个DNA分子用不同限制酶切割,产生的黏性末端一般不相同。 (2)不同限制酶切割形成的黏性末端,如果互补则可以相互重新配对。 一 二 三 四 三、与遗传有关的各种酶的比较 一 二 三 四 一 二 三 四 作用位点示意图 特别提醒(1)DNA连接酶和DNA聚合酶的作用都是催化形成磷酸二酯键,而不是氢键,氢键是分子间的静电吸引力,不需要通过酶的催化形成。(2)DNA连接酶只能在两个DNA片段间形成磷酸二酯键,而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有DNA片段上,且需要以一条DNA链为模板。 一 二 三 四 四、作为载体的条件 题型一 题型二 题型三 题型一 限制酶及其作用特点 【例1】 下列有关基因工程中限制酶的描述,正确的是 (　　) A.限制酶只能识别6个或8个脱氧核苷酸组成的序列 B.限制酶的活性受温度的影响 C.限制酶能识别和切割RNA D.限制酶只能从原核生物中提取 解析:限制酶能够识别并切割双链DNA上特定的核苷酸序列,多数限制酶能够识别6个核苷酸组成的序列,少数可以识别4,5或者8个核苷酸组成的序列。限制酶的化学本质是蛋白质,活性受温度影响。限制酶主要从原核生物中获得,同时在某些真核生物(如酵母菌)细胞内也存在。 答案:B 题型一 题型二 题型三 题型二 DNA连接酶及其作用特点 【例2】 下列有关DNA连接酶的叙述,正确的是(　　) A.T4DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来 B.E·coli DNA连接酶能将双链DNA片段平末端之间进