实训二细菌标本片的制备及染色法实训指导.docVIP

国家高等职业教育畜牧兽医专业教学资源库 《动物微生物与免疫技术》 实训二 细菌标本片的制备及染色法实训指导 实训目标 能利用不同的材料进行细菌标本片的制备，会进行常规染色，并认识细菌的不同染色特性。 仪器及材料 酒精灯、接种环、载玻片、吸水纸、生理盐水、美蓝染色液、革兰氏染色液、瑞氏染色液、染色缸、染色架、洗瓶、显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、细菌培养物(大肠杆菌、葡萄球菌等)、细菌病料、无菌镊子和剪刀、特种铅笔等。 方法与步骤 一、细菌标本片的制备 1．抹片 根据所用材料不同，抹片的方法亦有差异。 (1)固体培养物 取洁净的玻片一张，把接种环在酒精灯火焰上烧灼灭菌后，取1～2环的无菌生理盐水，放于载玻片的中央，再将接种环灭菌，冷却后，从固体培养基上挑取菌落或菌苔少许，与水混匀，作成直径1cm的涂面。接种环用后需灭菌。 (2)液体培养物 可直接用灭菌接种环钩取细菌培养液1～2环，在玻片上作直径1cm的涂面。 (3)液体病料(血液、渗出液、腹水等) 取一张边缘整齐的载玻片，用其一端醮取血液等液体材料少许，在另一张洁净的玻片上，以45°角均匀推成一薄层的涂面。 (4)组织病料 以无菌剪刀、镊子剪取被检组织一小块，以其新鲜切面在玻片上做数个压印或涂抹成适当大小的一薄层。 无论何