CN102792887A一种大蒜试管鳞茎的诱导方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局 *CN102792887A* (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 102792887 A (43)申请公布日 2012.11.28 (21)申请号 201210263069.4 (22)申请日 2012.07.27 (71)申请人 天津师范大学 地址 300387 天津市西青区天津师范大学生 命科学学院西青区宾水西道393 号 (72)发明人 王振英 李转春 彭爱芳 刘晓颖 范宝莉 陈宏 (74)专利代理机构 天津市杰盈专利代理有限公 司 12207 代理人 朱红星 (51)Int.Cl. A01H 4/00 (2006.01) 权利要求书 1 页 说明书 6 页 附图 1 页 权利要求书1 页 说明书6 页 附图1 页 (54)发明名称 一种大蒜试管鳞茎的诱导方法 (57)摘要 本发明公开了一种大蒜试管鳞茎诱导的新方 法。主要用4℃低温处理大蒜幼嫩花苞诱导气生 鳞芽，在MS+2.5mgKT+0.5mgNAA 培养基上复壮气 生鳞芽，在不加激素的MS+60g/L 蔗糖培养基上诱 导试管鳞茎，提高用气生鳞茎做种子进行大蒜快 繁的繁殖效率，降低了成本。本发明的积极效果 是，利用该方法气生鳞芽诱导率可达到100%（每个 花苞均可以诱导出气生鳞芽），每个花苞平均可诱 导出25 颗气生鳞芽，气生鳞芽全部可以诱导成试 管鳞茎，试管鳞茎诱导率达100%。由于在整个诱 导过程中，没有发生细胞脱分化和再分化，从而降 低了遗传突变几率, 该发明为大蒜快繁工厂化育 苗提供重要的可能性。 A 7 8 8 2 9 7 2 0 1 N C CN 102792887 A 权 利 要 求 书 1/1 页 1. 一种大蒜试管鳞茎的诱导方法，其特征在于按如下的步骤进行 : （1）大蒜花苞采摘及处理 田间种植的大蒜甩辫后7-10 天，采摘花苞200 个，每个花苞带15-20cm 的假茎，置太阳 下晾晒，将花苞平均分成2 份，用硫酸纸将带假茎的花苞包好，外套敞口的塑料保鲜袋； （2）低温诱导气生鳞芽 将幼嫩大蒜花苞在4-6℃冰箱中低温诱导30 天，待长出气生鳞芽后将将外衣和假茎去 除备用； （3）复壮气生鳞芽 A. 以MS 培养基为基本培养基，在1L培养基中加a- 萘乙酸0.5mg，激动素2.5mg，蔗糖 30g，琼脂7.5g，定容至1000ml， pH 值调为5.8，在121℃、1.1kg ／cm 高温高压灭菌20min， 待灭菌后的培养基冷却至60℃时，分装到100ml的培养瓶中，每瓶20ml培养基，把口封好以 防染菌，备用； B. 将低温诱导生出的气生鳞芽解剖，剥离单个气生鳞芽，流水冲洗5-10min，75% 酒精 消毒1-3min，10% 安替福民消毒4-8min，蒸馏水冲洗3-5 次，超净台上接种；在人工气候箱 中复壮培养，培养条件：25℃，光照12h/d，光强度2000LX ； （4）试管鳞茎的诱导 以MS 为基本培养基，在1LMS基本培养基中加入60g/L 蔗糖，然后再将复壮的气生鳞芽 直接接种到此培养基上，培养条件是：25℃，光照12h/d，光强度2000LX，40 天后统计试管鳞 茎诱导率。 2 2 CN 102792887 A 说 明 书