β2-微球蛋白测定标准操作程序SOP文件.docVIP

β2-微球蛋白测定标 准操作程序SOP文件 1 测定方法 免疫比浊法。 2 测定原理 标本中的β2-微球蛋白（β2-microglobulin）与试剂中包被有抗β2-微球蛋白抗体的胶乳颗粒相遇，发生特异性的抗原-抗体反应，形成抗原-抗体复合物，使溶液的浊度发生改变。该浊度的高低在一定抗体存在时与抗原的含量成正比，待反应完成后测定其浊度，从而使β2-微球蛋白得以测定。 3 标本 血清及肝素-Li或EDTA抗凝血浆, 处理方法见标本处理程序。 稳定性：2 - 8℃ -20℃ 4 试剂 4.1 试剂 来源：ROCHE配套 试剂（详见试剂说明书）。 贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃ R1：打开后机上稳定90天 R2：打开后机上稳定90天 准备：直接使用。 4.2 校准物 来源：ROCHE配套校准物，符合WHO标准，具体如下： S1: 0.9%的NaCl S2-6：定标液3a-e 贮存条件：校准物在2-8℃ 准备: 打开瓶时注意避免损失干粉，准确加入蒸馏水1.0ml。小心关上瓶盖，小心混匀，避免形成泡沫。 定标频率：A 试剂批号更换 B 由质控结果决定 4.3 质控物 来源：Precinorm ?2-Microglobulin (罗氏?2-Microglobulin正常值质控) Precipath ?2-Microglobulin (罗氏?2-Microglobulin病理值质控) 其它适合的质控品 贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。 准备：直接使用。 质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。 5 仪器 ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。 6 操作 见ROCHE MODULAR P生化分析仪作业指导书。参数设置见附表。 7 参考范围 0.8-2.2mg/l。 8 线性范围 本法线性范围为0.2-8.00mg/l，不准确度允许范围±3SD，不精密度CV=1.97%，灵敏度为0.03mg/l。 9 注意事项 9.1 定标液的供体可排除患有乙肝，丙肝和艾滋病。但是，不能排除患有某种传染病的危险。处理时应该视同标本处理。 9.2 血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。 9.3 换算公式：mg/l = ug/ml 9.4 仅应用于体外诊断。 10抗干扰能力： 10.1 标准：回收率在90％－110％之间。 10.2 黄疸：黄胆指数达到54时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为54mg/dl）。 10.3 溶血：溶血指数达到1000时不会有明显干扰。（血红素浓度约为1000mg/dl）。 10.4 脂血：乳糜指数达到750时不会有明显干扰。（甘油三酯浓度约为1500mg/dl）。 10.5 RF 200Iu/ml时无干扰。 11 临床意义: 1968年，Berggard等人在Wilson?S病及镉中毒病人的尿液中发现β2-微球蛋白，β2-微球蛋白是一小球型多肽，其分子量为11800道尔顿。它与主要组织相容性复合物（MHC）抗原5（HLA）的轻链相同，其三级结构与免疫球蛋白IgG的CH3区域相似，在血浆外所有有核细胞的外表面均可以表达β2-微球蛋白（滋养层细胞除外）。β2-微球蛋白由100个氨基酸组成，其在第25位、81位上结合有硫而使之形成双硫环。β2-微球蛋白与MHC抗原的一级结构通过非共价键结合，并且与骨来源的生长因子2（BDGF）、CRG-8、胸腺素结构相似。β2-微球蛋白正常情况下通过肾脏排泄，能自由通过肾小球滤过膜，其中的99.9％通过近球小管进行重吸收。 在淋巴系统肿瘤中（如慢性淋巴细胞白血病、T-细胞性白血病、非何杰金氏淋巴瘤、何杰金氏淋巴瘤及多发性骨髓瘤），血清中β2-微球蛋白浓度的升高程度与肿瘤的大小密切相关，并且β2-微球蛋白是预示多发性骨髓瘤转归的最好的指标。在肾脏疾病（如肾小球性疾病、肾小管性疾病及肾脏衰竭）时，β2-微球蛋白的浓度也会升高，另外β2-微球蛋白的浓度也可以用于监测肾脏移植的患者。在一些感染性疾病时（如HIV、CMV、EBV及类风湿性关节炎、自身免疫性疾病），血清中β2-微球蛋白的浓度也会增高。尿液中的β2-微球蛋白的浓度的升高可见于肾小球、肾小管及肾脏移植后的排斥反映等情况下。而且，尿液检测β2-球蛋白有助于早期发现CMV感染。