κ轻链（Kappa）测定标准操作程序SOP文件.docVIP

ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-40 κ轻链（Kappa）测定 版序：2005-1 页码：第 页，共3 页 1 测定方法 免疫比浊法 2 测定原理 血清中的κ轻链（Kappa）与试剂中的抗κ轻链抗体相结合，发生特异性的抗原-抗体反应，形成不溶性免疫复合物，检测浊度， Kappa的浓度与浊度成正比。 3 标本 3.1 血液：血清及肝素-Li或Na/K-肝素，K-EDTA抗凝血浆, 处理方法见标本处理程序。 稳定性：2 －8℃ 4天 -20℃ 3.2 尿液：应用及时尿液或者24小时尿，不需要稀释。标本立即进行检测不能冰冻。 4 试剂 4.1 试剂 来源：ROCHE配套 试剂（详见试剂说明书）。 贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2 - 8℃ R1：打开后机上稳定90天 R2：打开后机上稳定90天 准备：直接使用。 4.2 校准物 来源：ROCHE配套校准物，符合WHO标准 CRM470,具体如下： S1-6：血清蛋白定标液 批特异的定标液的靶值乘以下列的转换因子，用来计算定标曲线。 S1:0.1021 S2:0.1272 S3:0.1505 S4:0.6154 S5:1.2973 S6:2.8571 贮存条件：校准物在2-8℃ 准备:直接使用。 定标频率：A试剂批号更换 B 由质控结果决定 ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-40 κ轻链（Kappa）测定 版序：2005-1 页码：第 页，共3 页 4.3 质控物 来源：Precinorm protein (罗氏蛋白正常值质控) Precipath protein (罗氏蛋白病理值质控) 其它适合的质控品 贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。 准备：需要进行1+15倍稀释后再使用。 质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。 5 仪器 ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。 6 操作 见ROCHE MODULAR P生化分析仪作业指导书。 7 参考范围 kappa Kappa/lambda 血清 尿液 1.38-3.75 1.17-2.93 0.75-4.50 8 线性范围 本法线性范围为血清/血浆：0.5-9.0g/l，尿液：3-70mg/dl，不准确度允许范围±3SD，不精密度CV=2.0%，灵敏度为0.5g/l。 9 注意事项 9.1 血液标本检测前需要用Nacl 0.9%进行1+15稀释，本仪器可自动进行稀释。 9.2 尿液标本不能冰冻，应尽量用新鲜标本。 9.3 血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。 9.4 换算公式：mg/dl × 0.01 ＝ g/l mg/dl × 0.126 ＝ umol/l 9.5 仅应用于体外诊断。 10抗干扰能力： 10.1血液： 10.1.1 标准：回收率在90％－110％之间。 10.1.2 黄疸：黄胆指数达到60时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl） ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-40 κ轻链（Kappa）测定 版序：2005-1 页码：第 页，共3 页 10.1.3 溶血：溶血指数达到500时不会有明显干扰。（血红素浓度约500mg/dl） 10.1.4 乳糜：甘油三酯的浓度在1000mg/dl以下不会受到明显干扰。 10.1.5 RF300Iu/ml不会受到明显干扰。 10.1.6 kappa的浓度低于35g/l时不会有HOOK效应。 10.2 尿液： 10.2.1标准：回收率在90％－110％之间。 10.2.2 黄疸：黄胆指数达到51时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为51mg/dl） 10.2.3 溶血：溶血指数达到200时不会有明显干扰。（血红素浓度约为200mg/dl） 10.2.4 尿胆原：80umol/l,UA60mg/dl,白蛋白4g/l时不会有干扰。 11 临床意义 定量检测不同种类的轻链的含量有助于诊断多发性骨髓瘤（浆细胞异常增生的肿瘤）、淋巴瘤（淋巴组织的恶性肿瘤）、巨球蛋白血症（巨型球蛋白生成增多）及结缔组织病（如类风湿性骨节炎、系统性红斑狼疮）等疾病。 在正常情况下，每个浆细胞克隆都产生一种均一的含有κ或λ轻链的免疫球蛋白分子，在血清中κ：λ的比值正常应为2：1。完整的免疫球蛋白由于其分子量很高而不会在尿液中出现。游离的轻链由于其分子量较低，则使其可以通过肾小球滤过，但同时也能在肾小管中被重吸收。因此虽然它可以进入原尿，但终 尿中的免疫球蛋白的浓度正常情况下仍然很低。 细胞克隆的异常增生将导