P-AMY测定标准操作程序SOP文件.docVIP

ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-08 P-AMY测定 版序：ABCD 页码：第1 页，共3 页 1 测定方法 酶动力学法。 2 测定原理 在孵育中加入两种不同的单克隆抗体来抑制标本中唾液淀粉酶（S-AMY）的活性，使后续的反应只有标本中的胰腺淀粉酶(P-AMY)保持活性。 5乙酰基-G7PNP + 5H2O 胰腺淀粉酶 2乙酰基-五糖 + 2对硝基酚-二糖 + 2乙酰基-四糖 + 2对硝基酚三糖 + 对硝基酚-四糖 + 乙酰基-三糖 然后，PNP-G2、PNP-G3、PNP-G4 等片断被 ?-葡萄糖苷酶裂解为PNP 以及葡萄糖。PNP 形成的颜色直接与P-AMY呈正比例。这种方法检测的结果可以与高压液相色谱法相比较。 3 标本 3.1 血液：血清、肝素或EDTA抗凝血浆，处理方法见标本处理程序。 稳定性：20-25℃ 7天 4－8℃ 7天 3.2 尿液：不能添加防腐剂。 稳定性：20-25℃ 2天 4－8℃ ?-AMY在酸性尿液中不稳定，在存储前要将PH调节至碱性范围。 4 试剂 4.1试剂 来源：ROCHE配套 试剂（详见试剂说明书）。 贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃ R1：打开后机上稳定28天 R2：打开后机上稳定28天 准备：直接使用。 4.2 校准物 来源：ROCHE配套校准物,具体如下： S1:0.9%NaCl S2:C.f.a.s （货号：759350） 贮存条件：校准物在2-8℃ 准备：直接使用。 定标频率：A 试剂盒在仪器上放置28天后 B试剂批号更换后 C 由质控结果决定 ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-08 P-AMY测定 版序：ABCD 页码：第2 页，共3 页 4.3 质控物 来源：Precinorm (罗氏正常值质控) Precipath (罗氏病理值质控) 其它适合的质控品 贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。 准备：直接使用。 质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的 5 仪器 ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。 6 上机操作 见仪器作业指导书。 7 参考范围 U/l Ukat/l 血清/血浆 28-100 0.47-1.67 随机尿 460 7.67 ?-AMY/肌酐* 310u/g 5.17ukat/g 注：* ：?-AMY/肌酐比率，即同时检测?-AMY和Creatinine的浓度，计算出比值： 比率(U/g或者ukat/mmol)= ?-amy(U/l或者ukat/l) ÷ Crea(g/l或者mmol/l) 另外，还可计算?-AMY/肌酐的清除率(ACCR)，即同时检测的血液和尿液中的?-AMY的活性和Creatinine的浓度，计算出比值： ACCR% = （尿AMY × 血Crea）÷（血AMY × 尿Crea）× 100 ACCR的正常范围在2-5%。 8 性能指标 本法线性范围为3-1500U/l，不准确度允许范围±10%，不精密度CV=1.4%，灵敏度为3U/l。 9 注意事项 9.1 EDTA抗凝血浆的检测值大约要比血清值低7.5%。 9.2 唾液污染标本会对结果产生严重的影响。 9.3 R2的轻度发黄不会有干扰检测。 9.4 血清标本出现溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。 ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-08 P-AMY测定 版序：ABCD 页码：第3 页，共3 页 9.5 换算公式：U/l × 0.0167 = ukat/l 9.6 仅应用于体外诊断。 9.7 扔弃废物应符合当地的法规。 10抗干扰能力： 10.1 标准：回收率在90％－110％之间。 10.2 黄疸：黄疸指数达到60时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl） 10.3 脂血：乳糜指数达到1500明显干扰。（甘油三酯浓度约为3000mg/dl）。 10.4 溶血：溶血指数达到500时不会有明显干扰。（血红素浓度约为500mg/dl） 10.5 葡萄糖的浓度低于2000mg/dl不会有干扰，在4500mg/dl浓度附近会造成回收率降低10%。 10.6 Vc的浓度低于100mg/dl时不会有干扰，当浓度在880mg/dl附近时会使会受率降低10%。 11 临床意义 胰腺型淀粉酶(P-AMY) 的检测对于诊断胰腺炎更有绝对意义，具有器官特异性。主要适用于对急性胰腺炎及慢性胰腺炎急性发作时的诊断以及监测治疗。因其灵敏度及特异性均较高，胰腺型淀粉酶的诊断值可以与酯酶相似。在急性胰腺炎的诊断中，