食品安全亚硝酸盐与硝酸盐的测定.pptVIP

（3）亚硝酸钠总量的测定 吸取 20mL 还原后的样液于 50mL 比色管中，分别加入 2mL对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置 3min～5min 后各加入 1mL 盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置 15min，用 2cm 比色杯，以空白管调节零点，于波长538nm 处测吸光度。代入标准曲线计算。 六、结果计算 试剂空白不为零时应扣除。 样品溶液有颜色时，应先不加显色剂测定吸光度，再从加显色剂后测得的吸光度中扣除。 亚硝酸盐含量结果应换算成以NaNO2计，并保留两位有效数字。 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 六、结果计算 硝酸盐含量的计算（以NaNO3计） X2=(X-X1) ×1.232 X2——试样中硝酸钠的含量，毫克每千克（mg/kg）； X——经镉柱还原后测得总亚硝酸钠的含量，毫克每千克 （mg/kg）。 X1——计算出的试样中亚硝酸钠的含量，毫克每千克 （mg/kg）。 1.232——亚硝酸钠换算成硝酸钠的系数； 七、玻璃量器洗涤和干燥 先用机械方法除去量器上的污染物，如用毛刷刷，或用水摇动(必要时可加入滤纸碎片)。油或油类物质可选用适当的溶剂去除，然后注入低泡沫洗涤液并用力摇晃（必要时可以超声）。 若内壁仍不够清洁，可用下述洗液洗涤： （1）重铬酸钾-浓硫酸的混合液（100g/L）。 （2）等量的30g/L的高锰酸钾溶液和1mol/L的氢氧化钠的混合溶液。 然后用自来水冲洗，直至洗涤液全部冲净，再用纯水洗三次。 一般洗净后的玻璃量器应自然风干。若急用，建议玻璃量器烘干温度不得超过150℃ 。 Thank you! 2014.03.24 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定 一、方法适用范围及原理 亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺分光光度法测定，方法的检出限为1mg/kg,定量限为3mg/kg。 硝酸盐采用镉柱还原法测定，方法的检出限为10mg/kg，定量限为30mg/kg 。 方法原理 试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准系列比较定量。 采用镉柱将硝酸盐还原成亚硝酸盐，测得亚硝酸盐总量，由此总量减去亚硝酸盐含量，即得试样中硝酸盐含量。 二、实验准备 （一）试剂配制 （二）标准溶液的配制 （三）主要仪器 （四）镉柱 （一）试剂配制 试验用水应为蒸馏水、纯净水或去离子水，不能用自来水。 购买试剂时要注意试剂名称和分子式是否与标准方法一致。例如：亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6.3H2O]、乙酸锌[Zn(CH3COO)2.2H2O]、硼酸钠[Na2B4O7.10H2O]、对氨基苯磺酸[C6H7NO3S]、 盐酸萘乙二胺[C12H14N2.2HCL] 氨缓冲溶液：量取 30mL 盐酸，加 100mL 水，混匀后加65mL 氨水，再加水稀释至 1000mL，混匀。调节 pH 至 9.6～9.7（用PH计）。 氨缓冲液的稀释液：量取 50mL 氨缓冲溶液，加水稀释至 500mL，混匀。 （二）标准溶液配制 购买固体标准的，应注意亚硝酸钠（NaNO2）、硝酸钠（ NaNO3）均应为优级纯（GR），称量前，必须在硅胶干燥器中干燥24小时以上 。 购买液体标准溶液的，应注意其标示的浓度是以N计、以NO2-计 、以NO3-计，最后结果均应换算成 以NaNO2计 。 亚硝酸钠、硝酸钠标准储备溶液（200μg/mL，以NaNO2计）应置棕色瓶中5 ℃以下冷藏保存，有效期6个月。 亚硝酸钠、硝酸钠标准使用液（5.0μg/mL 、以NaNO2计）、必须临用前现配。 （三）主要仪器 小型绞肉机、粉碎机、匀浆机。 天平：感量为0.1mg和1mg。 分光光度计 ：2cm比色皿。 镉柱 （四）镉柱的制备 投入足够的锌皮或锌棒于 500mL 硫酸镉溶液(200g/L)中，放置 3h～4h。 当镉全部被锌置换后，用玻璃棒轻轻刮下，取出残余锌棒，使镉沉底，倾去上层清液，以水用倾泻法多次洗涤（10次以上）。 移入组织捣碎机中，加 500mL 水，捣碎约 2s，用水将金属细粒洗至标准筛上，取 20 目～40 目之间的部分（颗粒大小约同食用盐）。 （四）镉柱的装填 先用水装满镉柱玻璃管，然后装入 2cm 高的玻璃棉做垫，将玻璃棉压向柱底时，应将其中所包含的空气全部排出。 在轻轻敲击下加入海绵状镉至 8cm～10cm 高，上面再用 1cm 高的玻璃棉覆盖，上置一贮液漏斗。 当镉柱填装好后，先用 25mL 盐酸(0.1mol/L)洗涤，再以水洗两次，每次 25mL。 镉柱不用时，必须用水封