实验8植物可溶性糖的测定.pptVIP

实验八 植物可溶性糖的测定 实验原理 糖在硫酸作用下生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用生成绿色络合物，颜色的深浅与糖含量有关，在625 nm波长下OD值与糖含量成正比，由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化，故必须在反应后立即在同一时间内比色。 实验材料 小麦干种子 小麦萌发种子 萝卜干种子 萝卜萌发种子 均为市售，萌发条件为25℃下黑暗萌发3天。 实验步骤 1 可溶性糖的提取： 分别取2粒干种子和萌发种子于研钵中，加80%乙醇少许，磨成匀浆，倒入大试管中， 再用80%乙醇洗涤，水浴80℃半小时，冷却后转移至10ml量筒，并用80%乙醇定容至10ml。过滤，所得的透明液体即为可溶性糖提取液。 2 显色及比色：吸取上述糖提取液1ml，加入5ml蒽酮试剂，沸水浴10 min，冷却后于625nm处测OD值，从标线取得提取液中糖的浓度。 3 绘制标准曲线：取标准葡萄糖溶液将其稀释0、20、40、60、80μg/mL系列浓度，按上述方法分别测其OD值，绘制标准曲线。 计算： V 为植物样品提取液的体积 C 为提取液糖的浓度 W 为植物样重或为颗粒数 可溶性糖 % = CV/W 同一种子类型之间按每粒种子 计算 注意事项 1 定量实验，且涉及标准曲线绘制，分光光度计的使用，因此溶液配制、材料选取等方面