组合代谢调控提高大肠杆菌对氨基苯甲酸产量.docVIP

PAGE 2 眉题 PAGE 3 /cjbcn cjb@ PAGE 1 生物工程学报 生物工程学报 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn Supported by: Key Research Program of the Chinese Academy of Sciences (KFZD-SW-212-3-1), Research Equipment Program of Chinese Academy of Sciences (YJKYYQ201700233) Corresponding author: Qinhong Wang. Tel/Fax: +86-22 E-mail: wang_qh@ 中国科学院重点部署项目（KFZD-SW-212-3-1），中国科学院科研仪器设备研制项目（YJKYYQ201700233） 工业生物技术 工业生物技术 组合代谢调控提高大肠杆菌对氨基苯甲酸产量 徐毅诚1,2,3，路福平1,3，王钦宏2 1 天津科技大学 工业发酵微生物教育部重点实验室 生物工程学院，天津 300457 2 中国科学院天津工业生物技术研究所 中国科学院系统微生物工程重点实验室，天津 300308 3 天津科技大学 生物工程学院，天津 300457 摘 要:对氨基苯甲酸是一种重要的有机合成中间体，广泛应用于医药、染料等行业。近年来对氨基苯甲酸作为一种潜在的高强度共聚物组分单体越来越受到重视。对氨基苯甲酸作为叶酸合成的前体之一，其合成在大肠杆菌体内由叶酸合成途径的pabA、pabB和pabC三个基因负责，催化以分支酸为前体合成叶酸前体之一的合成对氨基苯甲酸；但是。正常生长条件下，大肠杆菌不积累和少量积累对氨基苯甲酸。本研究以实验室构建的酪氨酸高产工程菌 TYR002作为出发菌株，首先弱化双功能分支酸突变酶/预苯酸脱氢酶 TyrA的表达，以减少酪氨酸积累，然后利用3种不同强度的组成型启动子分别调控重组质粒上3个对氨基苯甲酸合成基因pabA、pabB和pabC的表达。摇瓶发酵表明不同的组合调控模式下使大肠杆菌发酵培养基中的对氨基苯甲酸积累量存在显著差异差异明显的对氨基苯甲酸，最高可获得0.67 g/L的摇瓶发酵产量。进一步通过发酵条件优化和分批补料发酵，在5L发酵罐中获得了6.4 g/L的对氨基苯甲酸产量。本研究为改善对氨基苯甲酸生物合成效率提供了重要理论参考。 关键词: 对氨基苯甲酸，大肠杆菌，组合调控，代谢工程，叶酸合成途径 Improving the production of 4-aminobenzoic in engineered Escherichia coli by combinatorial regulation Yicheng Xu1,2,3, Fuping Lu1,3, and Qinhong Wang2 1 Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology, Ministry of EducationCollege of Biotechnology, Tianjin University of Science Technology, Tianjin 300457, China 2 CAS Key Laboratory of Systems Microbial Biotechnology, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Science, Tianjin 300308, China 3 College of Biotechnology, Tianjin University of Science Technology, Tianjin 300457, China Abstract: Para-aminobenzoate（PABA） is an important chemical intermediate for organic synthesis and it has been extensively used in pharmaceutical and dye industryindustries like medicine and dyes. In recent years, PABA has received increasing attention as a potential component of high-strength copolymer. In Escherichia co