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- 2020-02-17 发布于上海
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课程标准举例说出细胞融合与单克隆抗体。课标解读1.概述动物细胞融合技术。2.概述单克隆抗体的制备过程及单克隆抗体的特点及应用。3.比较动物细胞融合与植物体细胞杂交技术。 动物细胞融合1.概念 或 动物细胞结合形成 的过程,也称细胞杂交。2.原理 细胞膜的流动性。3.诱导融合的方法 (1)物理、化学方法:与植物体细胞杂交相同,如聚乙二醇、电激法等。 (2)生物方法:灭活的病毒。一个细胞两个多个灭活的病毒遗传信息杂交5.结果 形成 细胞。6.意义 突破了 方法的局限,使 成为可能。成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和 等的重要手段。如:利用 ,为制造单克隆抗体开辟了新途径。杂交远缘杂交有性杂交生物新品种培育杂交瘤技术[思维激活1] 进行动物细胞融合时为何常使用多个而不只是两个细胞进行融合? 提示 动物细胞融合中不用两个而用多个细胞进行细胞间融合,其原因为: 就目前常用的细胞融合方法来看,不管是用物理的、化学的方法,还是用生物的方法,其融合率都不可能是100%。仅用两个细胞融合,其效率太低,不一定能得到融合细胞。1.对细胞膜融合过程的理解(1)细胞融合的过程包括细胞膜的融合、细胞质融合和细胞核融合,其中细胞膜的融合是细胞融合的先导,在细胞膜融合中体现出细胞膜具有流动性。(2)诱导融合的方法有灭活的病毒(最常见)、聚乙二醇(PEG)和电激等。2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的对比植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性细胞融合方法用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散后,诱导细胞融合诱导手段离心、电激、振动、聚乙二醇等诱导与植物体细胞杂交相比,还可用灭活的病毒诱导结 果获取杂种植株获得杂种细胞,以生产细胞产品用 途克服远缘杂交不亲和的障碍,扩展杂交亲本范围,培育新品种制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等意义突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能特别提醒 重组细胞的特点:融合形成的杂交细胞具有两个细胞的遗传特点,通过动物细胞培养,杂交细胞能表现出两个亲本的性状。灭活的病毒是动物细胞融合常用的诱导剂,植物体细胞杂交不用此诱导剂。【巩固1】 无论是植物细胞,还是动物细胞,都可以利用一定的方法诱导融合,可用模型图表示细胞融合技术的一些过程,有关叙述错误的是 ( )。A.若该过程表示植物原生质体的融合,则甲、乙细胞可用酶解法获取B.若该过程表示体外受精,则甲、乙细胞都需要经过准备阶段C.若该过程表示制备单克隆抗体,则丙细胞是杂交瘤细胞D.以上三个过程可以用同一种诱导剂诱导融合解析 若图示过程表示植物原生质体的融合,在形成甲、乙细胞之前需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,可用聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合;若图示过程表示体外受精,则甲、乙细胞应代表精子与卵细胞,其中精子需要获能处理,卵细胞需要培养成熟,两者可在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精;若图示过程表示单克隆抗体的制备,则丙细胞是B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞,可用聚乙二醇(PEG)或灭活的病毒诱导细胞融合;可见,以上三个过程不能用同一种诱导剂诱导融合。答案 D单克隆抗体 1.制备原理 (1)浆细胞特点:一种浆细胞产生一种单一抗体,B淋巴细胞在体外 (能/不能)无限增殖。 (2)骨髓瘤细胞特点:能无限增殖。 (3)杂交瘤细胞特点:浆细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞,既能无限增殖,又能产生特异性抗体。不能2.制备过程3.单克隆抗体优点: 、并可大量制备。4.单克隆抗体的应用 (1)作为诊断试剂,具有准确、 、简易、 的优点。 (2)用于治疗疾病和 。特异性强、灵敏度高快速高效运载药物[思维激活2] 用单克隆抗体及相关物质制成的“生物导弹”中真正起治疗作用的物质是什么?是单克隆抗体吗? 提示 “生物导弹”中真正发挥治疗作用的物质是相关“药物”,单克隆抗体所起的作用在于将药物定向带到靶细胞所在位置,借助其导向作用,在原位杀死癌细胞,这样既不损伤正常细胞,又减少了用药剂量。因此,“生物导弹”可作为一种疗效高、毒副作用小的新型药物。1.单克隆抗体和常规抗体的比较项目分泌抗体的细胞特点生产单克隆抗体杂交瘤细胞特异性强、灵敏度高产量高,易纯化分离常规抗体浆细胞特异性差、灵敏度低产量低,分离困难2.单克隆抗体的制备及应用 (1)原理:要获得大量的单一抗体,必须克隆单一的浆细胞,形成细胞群;将浆细胞与骨髓瘤细胞融合,其原因如下: ①每一个浆细胞只能分泌一种特异性抗体;不同种类的浆细胞分泌的抗体不同。 ②浆细胞在体外培养时不能无限增殖;骨髓瘤细胞能无限增殖。 ③浆细胞与骨髓瘤细胞的杂交细胞既能无限增殖,又能产生特异性抗体。(2)单克隆抗体的制备过程:(3)单克隆抗体的应用:①作为诊断试剂:能准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟一定
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