第十二章临床遗传学.pptVIP

遗传咨询是通过医生与咨询者共同商讨咨询者提出的各种遗传学问题和在医生指导下合理解决这些问题的全过程。 一、 遗传咨询概述 History 1940’s Roots of Genetic Counseling 1974 Introduction of psychology 1993 American Board of Genetic Counselors 基因治疗的关键因素 靶细胞选择 基因治疗方法 基因转移方法 基因治疗的靶细胞（一） 造血干细胞 成纤维细胞 肝细胞 肌细胞 淋巴细胞 肿瘤细胞 基因治疗的靶细胞（二） 靶细胞的选择须考虑： 最好为组织特异性细胞； 细胞较易获得，且生命周期较长； 离体细胞较易受外源基因转化； 离体细胞经转染和一定时间培养后再植回体内，仍 较易成活。 基因治疗的靶细胞 －－造血干细胞 骨髓细胞是最主要的造血干细胞： 优点：1) 获取方便，易于植回体内； 2) 具有不断分裂、分化成各种血细胞的潜能； 3) 基因产物可通过血循环遍布全身。 应用：转入外源β珠蛋白基因、腺苷脱氨酶基因、 二氢叶酸还原酶基因、多重耐药基因。 不足：表达水平，持续时间。 基因治疗的靶细胞 －－造血干细胞 骨髓细胞是最主要的造血干细胞： 优点： 获取方便， 易于植回体内 基因治疗的靶细胞 －－成纤维细胞 是一种重要的基因治疗受体细胞： 优点：1) 易获取和体外培养，易植回体内； 2) 易转染，能稳定表达外源基因； 3) 植回的成纤维细胞容易被取出。 应用：腺苷脱氨酶基因、葡糖脑苷脂酶基因、神经生长因子基因；转染细胞因子的成纤维细胞治疗肿瘤。 三、基因治疗的方法 基因治疗的方法： 直接治疗方法，间接治疗方法 基因转移的方法： 物理法，化学法，生物法 区分概念 基因转移的途径： 体内途径，体外途径 基因治疗方法 1.直接基因治疗 直接纠正突变基因，可以是基因修复，也可以是基因代替，在原位修复缺陷的基因，以达到治疗目的。是较理想的基因治疗方法，但具体的基因操作比较困难，直接基因治疗较难开展。 基因治疗方法 2.间接基因治疗 不直接纠正突变 基因，仅仅导入外源正常基因，功能上代替有缺陷的基因。对靶细胞而言，没有去除或修复有缺陷的基因。外源基因在靶细胞中的表达可弥补病变基因的功能不足，起到治疗遗传病的目的。 两种方法都要应用DNA重组技术，修复细胞中的缺陷基因，使细胞恢复正常功能而达到治疗遗传病的目的。 基因治疗方法 载体 目的基因 in vivo ex vivo 受体细胞 基因转移途径 基因转移方法 基因转移方法  基因转移方法 物理方法：注射、基因枪、电穿孔、显微注射 化学方法：磷酸钙、葡聚糖、脂质体 生物学方法：病毒载体：逆转录病毒、腺病毒、 单纯疱疹病毒、腺相关病毒、嵌合病 毒等 基因治疗方法 基因转移途径 物理方法 1)裸DNA直接注射 2)基因枪介导的皮内或皮下导入 3)显微注射 4)电穿孔 cells obtained from skin biopsy gene introduced into cells by electroporation genetically engineered cells are propagated cells are reinjected Ex vivo electroporation 物理方法 化学方法 1)磷酸钙共沉淀法 2)DEAE-葡聚糖转染法 3)脂质体转染法 liposome nucleus DNA endocytosis complex membrane fusion Liposome-mediated Gene Transfer DNA liposome complexes Liposomes 生物学方法 Viral vectors Retroviruses (逆转录病毒） Moloney murine leukaemia virus (Mo-MuLV) Adenoviruses （腺病毒） Adeno-associated viruses (AAV)（腺相关病毒） 物理方法 化学方法 Retroviral gene therapy 基因治疗 一、基因治疗的概况 二、基因治疗的原理与策略 三、基因转移的方法 四、基因治疗的应用 五、基因治疗存在的问题 四、基因治疗的应用 1.遗传病的基因治疗 2.恶性肿瘤的基因治疗 3.病毒性感染的基因治疗 遗传病的基因治疗研究