吉林大学有机化学实验番茄色素提取分离.pptVIP

番茄色素的提取分离;实验目的;实验原理： 番茄色素 Tomato Color 成分：主要成分为番茄红素（lycopene）和少量的β-胡萝卜素（ β- carotene)。 性质与指标：暗红色粉末或油状液体。溶于乙醇和油脂，不溶于水。油溶液呈橙色。耐热和耐光性优良。对热、光稳定，并有抗氧化能力。K＋、Na＋、Mg2＋和Zn2＋对色素影响不大，Fe3＋和Cu2＋引起色素的损失较大，Fe2＋、Al3＋引起的损失较少。 来源：以番茄的果实为原料，用油脂提取，或先脱水，再用己烷、醋酸乙酯、95％乙醇、氯仿或丙酮等有机溶剂提取，然后真空浓缩，脱去溶剂，得到粉末状的番茄红素。 用途：用于番茄制品、肉类、汤料、酱类、糖果、小吃食品和面点等的着色，为红色着色剂。 ;;色谱法;按分离机制，可分为： 吸附色谱：分子在两相中吸附性能不同，进行分离 分配色谱：分子在两相中分配系数不同，进行分离 离子交换色谱：分子在两相中离子交换性能不同，进行分离 体积排阻色谱：体积大的留在固定相的小孔内，体积小的先 流出。 亲和色谱：分子在两相中亲和力不同，进行分离。 电泳色谱、电色谱：离子在电场中移动的速度不同进行分离;按操作方式不同，又可分为： 柱色谱 气相色谱 高效液相色谱 薄层色谱 纸色谱 等;柱色谱;柱色谱 色层的展开首先选用极性较小的溶剂，使最容易脱附的组分分离。然后加入不同比例的极性溶剂配成的洗脱剂，将极性较大的化合物自色谱柱中洗脱下来。常用洗脱剂的极性： ;薄层色谱;纸色谱、薄层色谱的一般操作步骤;1.制板（纸）;;3.展开;4.显色;实验步骤;饱和氯化钠萃取;（2）滤渣重新装回圆底烧瓶内，加入10mL 二氯甲烷，加热回流5min,冷却后用折叠滤纸过滤，将滤液直接过滤至分液漏斗内。 (3) 重复（2） ;.柱层析分离 （1）装柱：取干燥层析柱垂直固定在铁架台上，柱下端塞一小团脱脂棉并压紧。经干燥漏斗慢慢加入氧化铝，氧化铝层高约5cm左右，并不断敲打柱体使氧化铝填充得均匀密实，层面平整。 ;（2）加样：提取液无水硫酸钠干燥后，将绝大部分（仅留作1mL左右够薄层点样用即可）加入到50mL小烧杯中，加1.0g柱层析氧化铝??搅拌均匀后于通风橱内 40-45°水浴挥发掉溶剂。（注意：温度不能高，否则迸溅；用玻璃棒不断搅拌，注意保护眼睛） 将溶剂彻底蒸干后，将吸附有提取色素的氧化铝样品小心加到柱上， 并在样品层上面加一略小于柱内径的滤纸片。;洗脱与接收：先用石油醚洗脱胡萝卜素，约50mL，约20-30min，黄色可见；再换9:1石油醚：丙酮洗脱番茄红素，30mL左右，约10-15min。 ;3 薄层层析：柱层析接收液体通风橱内加热浓缩至1mL左右，尤其是胡萝卜素更要更浓一些，点样量也要多一些。点样点：提取液、胡萝卜素、番茄红素； 展开剂：9:1石油醚：丙酮，展开室为烧杯加封口膜。 ;点样 先用铅笔在距薄层板一端1cm处轻轻划一横线作为起始线，然后用毛细管吸取样品，毛细管与板（纸）垂直，在起始线上小心点样，吹干。斑点直径一般不超过2mm。若因样品溶液太稀，可重复点样，但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样，以防样点过大，造成拖尾、扩散等现象，而影响分离效果。 若在同一板上点几个样，样点间距离应为0.5-1cm，且不能离边沿太近。点样要轻，不可刺破薄层。;????????