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实验五、植物组织中过氧化氢酶活力测定;一、实验目的;二、实验原理;据此,可根据H2O2的消耗量或O2的生成量测定该酶活力大小。在反应系统中加入一定量(反应过量)的H2O2溶液,经酶促反应后,用标准高锰酸钾溶液(在酸性条件下)滴定多余的H2O2,即可求出消耗的H2O2的量。
5 H2O2 +2KMnO4+4H2SO4 =5O2+2KHSO4+8H2O+2MnSO4;三、材料、试剂与器具 ;3.器具
(1)恒温水浴;
(2)研钵;三角瓶50ml×4;酸式滴定管(10ml);容量瓶25ml×1等;四、实验步骤;2.反应
取50ml三角瓶4个(两个测定两个对照),测定瓶中加入酶液2.5ml,对照瓶中加入煮死酶液2.5ml,再加入2.5ml 0.1mol/L H2O2,同时计时,于30℃恒温水浴中保温10min,立即加入10% H2SO4 2.5ml。
3.滴定
用0.1mol/L KMnO4标准溶液滴定H2O2,至出现粉红色(在30min内不消失)为终点。;五、计算;六、研讨题;谢谢!
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