生物化学-第13章 DNA的生物合成－复制-CPL.ppt

也称反转录，以RNA为模板合成DNA的特殊复制方式（在某些生物如鸡的肉瘤病毒等）。 由逆转录酶催化，它具有以单链RNA为模板合成与其互补的DNA（cDNA），再水解杂交链上的RNA以及以cDNA为模板合成双链DNA三种酶活性。 逆转录现象和逆转录酶（reverse transcriptase）（H. Temin David Baltimore，1976）是分子生物学研究中的重大发现，是对经典中心法则的重要补充。 单链DNA复制—— 逆转录作用（reverse transcription） 反转录 过程 反转录酶 RNase H 反转录酶/DNA pol I 核酸酶S1 RNA模板 DNA/RNA模板 cDNA DNA 发夹 双链DNA For video, go to /video/6892/A-Visual-on-Reverse-Transcriptase 逆转录作用图 For video, go to /video/6892/A-Visual-on-Reverse-Transcriptase 思考题 1. DNA聚合酶的功能。 2. 半保留复制、半不连续复制、冈崎片段。 3. 参与DNA复制的主要酶及蛋白的作用。 4. 原核生物复制的过程。 5. 在DNA复制过程中，遗传信息的忠实性如何得到保证？ 6. DNA的损伤和修复系统。 7. DNA重组的概念及一般过程 * * * 原核生物线性DNA复制的终止机制还不清楚 3. 端粒 (telomere) 的复制 端粒: 是指真核生物染色体线性DNA 分子末端结构部分，通常膨大成粒状。 端粒 端粒DNA序列是多次重复的富含T、G碱基 的短序列。 TTTTGGGGTTTTGGGG… 端粒的功能: 补偿RNA引物切除后造成的空缺， 保证染色体复制的完整性。 稳定染色体的末端结构。 防止染色体间末端连接。 端粒酶 (telomerase) 含有RNA链的逆转录酶，能以RNA为模板合成端粒区的DNA片段。 端粒酶的爬行模型 /programs/view/CKnqkyacWFc/ 细胞愈老，端粒愈短；细胞愈年轻，端粒愈长。 当短至某一临界值，细胞终止分裂：衰老、死亡 细胞分裂一次，端粒DNA丢失约30-200bp，鼠和人的端粒一般长约10000bp。预测人类寿命 正常人体细胞中检测不到端粒酶。恶性肿瘤细胞具有高活性的端粒酶 真核生物中DNA的复制特点 真核生物染色体有多个复制起点，呈双向复制，多复制子。 冈崎片段长约200bp 。 真核生物DNA复制速度比原核慢。 真核生物有多种DNA聚合酶。 真核生物线性染色体两端有端粒结构，防止染色体间的末端连接。由端粒酶负责新合成链5?RNA引物切除后的填补，亦保持端粒的一定长度。 四、DNA结构的完整性 1. DNA复制的忠实性 至少依赖三种机制: 遵守严格的碱基配对规律 聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能（按模板要求选择底物） 复制出错时有即时的校读功能 2. DNA的损伤（DNA damage） 个别脱氧核糖核苷酸残基甚至片段在DNA的构成、复制或表型功能上的异常变化，称为DNA损伤。也称为突变（Mutation）。  引发损伤的因素: 环境中的理化因素，如紫外线和各种辐射及许多化学诱变剂，常常导致DNA突变。 如紫外线可引起DNA链上相邻的两个嘧啶 碱基发生共价结合，生成嘧啶二聚体。 如TT，TC，CC等二聚体。这些嘧啶二聚体由于形成了共价键连接的环丁烷结构，因而会引起复制障碍。 突变的分子改变类型: 点突变 (错配, mismatch) 缺失 (deletion) 插入 (insertion) 重排 (rearrangement) 正常成人血红蛋白Hb (HbA)β亚基 镰刀形红细胞 贫血病人Hb (HbS) β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · val · glu · · · · · · C 肽链 CAC GTG 基因 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · · · C 肽链 CTC GAG 基因 慢性溶血性贫血 易感染 再发性疼痛危象 由基因重排引起的两种地中海贫血基因型 3. DNA损伤的修复（DNA repairing） 修复的主要类型： 光修复(light repairing) 暗修复: 切除修复(excision repairing)