第5节核酸分子杂交.pptVIP

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  • 2020-03-12 发布于福建
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4.4 斑点印迹杂交和狭线印迹杂交 Dot blotting and slot blotting 适于核酸样品定性检测,而不是定量检测。 * 第五节 核酸的分子杂交 Nucleic Acid Hybridization Content of Table 前 言 1 核酸分子杂交技术的原理 2 核酸探针的制备 3 核酸探针的标记 4 核酸分子杂交技术 5 生物芯片技术 前 言 核酸分子杂交 把亲源关系较近的,不同生物个体来源的变性DNA或RNA单链,经退火处理形成DNA-DNA或DNA-RNA这一过程叫分子杂交。 Home 1 核酸分子杂交技术的原理 有互补特定核苷酸序列的单链DNA或RNA混在一起时,其相应同源区段将会退火形成双链结构。 如把一段已知基因(DNA或RNA)核酸序列用合适标记物(如放射性同位素、生物素等)予以标记,当作探针(probe), 与变性后的单链基因组DNA或RNA进行杂交。 再用合适方法(如放射自显影或免疫组织化学等技术)把标记物检测出来,就可确定靶核苷酸序列是否存在、拷贝数及表达丰度等。 应 用: (1)检测特定生物有机体之间是否存在亲缘关系; (2)用来揭示核酸片段中某一特定基因的存在与否、拷贝数及表达丰度。 Home 2 核酸探针的制备 2.1 探针(Prob

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