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实验一 分光光度计的性能检验 目 的 • （1）学会使用分光光度计。 • （2）掌握分光光度计的性能 检验方法。 实验原理 • （1）分光光度计的性能好坏，直接影响到测 定结果的准确性，因此新购仪器及使用一定时 间后，均需进行检验调整。 • （2 ）利用KMnO 溶液的最大吸收值来检验波 4 长的精度。 • （3 ）同种厚度的比色皿，由于材料及工艺等 原因，往往造成透光率的不一致，从而影响测 定结果，故在使用时需加以选择配对。 仪器和试剂 • （1）722型分光光度计 • （2 ）容量瓶：25ml 1支；100ml 1 支 • （3）吸量管：1ml 1支，10ml 1 支 • （4 ）0.2mol/L KMnO 溶液 4 • （5）0.02mol/L K Cr O 溶液 2 2 7 操作步骤1 • 1．比色皿透光率的检查 以空气的透光率为100%，则比色皿的透光率 应不低于84%，同时在450nm、650nm处测 其透光率，各透光率差值应小于5%。 • 2 ．比色皿的配对性 同种厚度的比色皿之间，透光率误差应小于 0.5%。 检查方法：将0.02mol/L的K Cr O 溶液5ml稀 2 2 7 释到25ml,分别注入厚度相同的几个比色皿中。 以其中一个比色皿的溶液做空白，在440nm波 长处分别测定其它各比色皿中溶液的透光率， 然后选择相差小于0.5%的比色皿使用。 操作步骤2 • 3.重现性 仪器在同一工作条件下(440)，用同种溶液 连续测定7次，其透光率最大读数与最小读 数之差(极差)应小于0.5%。 检查方法如下:以蒸馏水的透光率为100%, 用同一K Cr O 溶液连续测定7次，求出极 2 2 7 差，如小于0.5%，则符合要求。 操作步骤2 • 4.波长精度的检查 为了检查分光系统的质量,可用 KMnO 溶液的吸光度最大吸收波长525nm为标准, 4 在待检查仪器上测绘KMnO 溶液的吸收曲线。 4 检查方法如下:取0.2mol/L的KMnO 溶液0.3ml, 4 用水稀释到100ml。以水为空白调零，在 460~570nm处，每隔5nm分别测定吸光度，在坐 标纸上绘出吸收曲线。若测得的最大吸收波长在 525 ±10nm以内，说明该仪器符合使用要求。 722型分光光度计使用方法 • 1.开机后需预热20分钟。 • 2.波长设定需从短波向长波方向调整。 • 3.调零需在透射比模式下将比色皿架置于调零 档。 • 4.调满度时将空白样品置于光路，按100%T （OA）键。 • 5.按方式键可实现透射比，吸光度方式转换。 • 6.波长改变后千万不能忘了再调到零和调满度。 注意事项