分子生物学检验完整版.docxVIP

1 病原生物基因组在医学上有何应用？详见书 P3 a 菌种鉴定 b 确定病毒感染和病毒载量 c 病毒分析 d 细菌耐药监测和分子流行病学调查 2 什么是原癌基因，原癌基因有什么特性，原癌基因可以分为哪些种类以及原癌基因常见 的激活机制有哪些？ 原癌基因是指人类或其他动物细胞(以及致癌病毒)固有的一类基因，能诱导细胞正常转化并使之获得 新生物特征的基因总称。 特性：进化上高度保守，负责调控正常细胞生命活动，可以转化为癌基因。 功能分类：生长因子，生长因子受体，信号转导蛋白，核调节蛋白，细胞周期调节蛋白，抑制凋亡蛋 白 激活机制：插入激活，基因重排，基因点突变，基因扩增，基因转录改变 3 试述 Down 综合征（21 三体综合征）的主要临床特征及核型。 临床特征：生长发育障碍，智力低。呆滞面容，又称伸舌样痴呆。40%患者有先天性心脏畸形。肌张 力低，50%患者有贯通手，男患者无生育能力，女患者少数有生育能力，遗传风险高。 核型：92.5%患者游离型：核型为 47，XX(XY),+21 2.5%患者为嵌合型：46，XX(XY)/47，XX(XY),+21 5%患者为易位型：46，XX(XY),-14，+t(14q21q) 4 简述淋球菌感染的主要传统实验室诊断方法及其主要特点，对比分析分子生物学方法的 优势 直接涂片染镜检：敏感度和特异性差，不能用于确诊。 分离培养法：诊断 NG 感染的金标准，但是其对标本和培养及营养要求高，培养周期长，出报告慢， 难以满足临床要求。 免疫学法：分泌物标本中的非特异性反应严重以及抗体法间的稳定性和条件限制，推广受限。 分子生物学的优点：敏感，特异，可直接从了临床标本中检出含量很低的病原菌，适应于快速检测 5、在单基因遗传病的分子生物学检验中，点突变检测常用方法有哪些？ 1 异源双链分析法（HA）2 突变体富集 PCR 法 3 变性梯度凝胶电泳法 4 化学切割错配法 5 等位基因特 异性寡核苷酸分析法 6DNA 芯片技术 7 连接酶链反应 8 等位基因特异性扩增法 9RNA 酶 A 切割法 10 染色 体原位杂交 11 荧光原位杂交技术 6、简述白假丝酵母菌的分子生物学检验方法 白假丝酵母菌分子生物学检验主要包括白假丝酵母菌特异性核酸（DNA RNA）的检测、基因分型和耐 药基因分析等。 1PCR 技术：选择高度特异性的天冬氨酸蛋白酶基因设计引物 PCR—斑点杂交技术：正向杂交和反向杂交，后者可一次检测多种真菌 DNA 指纹技术：RFLPRAPD 电泳核型分析 AP—PCR 技术：定义方法简便，快速，特别适合临床应用 DNA 序列分析：可测定 rDNA 序列也适用于基因突变引起的耐药 基因芯片技术：适用于病原体的耐药研究 7、 F VIII 基因倒位导致血友病 A，DMD 基因外显子缺失导致与杜氏肌营养不良，珠蛋 白 基因突变导致与珠蛋白合成障碍性贫血。 （第 11 章，P197，P203，P207。窝觉得大家把题目读三遍就可以了） 答：F VIII 基因倒位是导致的血友病 A 的主要原因（占 50%）其它基因突变，如点突变，缺失，插入 也会导致血友病 A。 同理 DMD 基因外显子缺失是迪谢内肌营养不良（杜氏肌营养不良）发生的主要原因（60%-70%）。 珠蛋白合成障碍性贫血有六种，主要的两种是 α 珠蛋白生成障碍性贫血和 β 珠蛋白生成障碍性贫血，基 因突变是主要发病原因。 8、基因多态性有哪些的临床应用？（P4） 答：1、基因定位和遗传病相关性分析；2、疾病诊断和遗传咨询； 3、多基因病的研究；4、器官移植配型和个体识别 9.第一代测序技术特点。（p83） 答：优点：高读长，准确率一次性达标率高，能很好处理重复序列和多聚序列，易小型化。 缺点：通量低，单个样本制备成本相对较高，难以做大量的平行测序,小规模进行。 10. 慢粒融合基因。急性早幼粒融合基因。 答案：（一）慢粒融合基因（p229） BCR-ABL 融合基因：BCR-ABL 为 t（9；22）(q34;q11)染色体易位所产生的融合基因，可见于 25%-40% 的成人 ALL 和 4%-6%的儿童 ALL，更是 CML 的重要分子基础（95%），Ph1 染色体异常即为 t(9；22（q34;q11）易位。 (二)急性早幼粒融合基因（p230）（10-529） PML-RARa 融合基因：多数急性早幼粒细胞白血病（APL）有染色体 t(15;17)(q22；q21)的易位，位于 15q22 的早幼力粒细胞白血病(PML)基因的 17q21 的维 A 酸受体 a(RARa)基因融合成 PML/RARa。98%的 AML-M3 亚型发生该融合基因。 11 华法林用药监测常用何种基因多态性，它有何特点。 P264 监测 CYP2C9 基因多