柱色谱和纸色谱.pptVIP

柱色谱与纸色谱 目的和要求 初步掌握柱色谱和纸色谱的操作技能。 柱色谱 1. 原理 柱色谱：也叫柱层析，将混合物的溶液通过装有吸附剂的层析柱，利用吸附剂对各组分吸附能力的不同，经过洗脱剂的洗脱，将各组分分开的过程。 柱色谱的操作步骤： 装柱→加样→洗脱和分离 → 收集各组分 柱色谱 1. 原理 柱色谱分离示意图： 柱色谱 2. 样品 样品：偶氮苯和对羟基偶氮苯的混合物 洗脱剂（流动相）：石油醚 : 丙酮=8 : 2（体积比） 吸附剂（固定相）：中性层析氧化铝（200~300目） 柱色谱 3. 操作步骤 (1) 装柱 取15cm×1.5cm色谱柱一根或用25 mL酸式滴定管作色谱柱，垂直放置，用25 mL锥形瓶作接收瓶。 用玻棒将少许脱脂棉放置于干净的色谱柱底部，轻轻塞紧。关闭活塞，向柱中倒入洗脱剂到约柱高的3/4处。打开活塞，控制流速约1滴/s。 通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入吸附剂，用木棒轻轻敲打柱身下部，使其填装紧密，装至3/4时停止加吸附剂。 待洗脱剂将干时，轻轻放少许脱脂棉到吸附剂的上方。 柱色谱 (2) 加样 待洗脱剂即将流干时，立即沿柱内壁加入约10滴已配好的混合物。当此溶液即将全部浸入吸附剂时，再用少量洗脱剂冲洗下沾在内壁和棉花上的有色物质，如此反复2~3次，至洗净为止。 柱色谱 (3) 洗脱分离，样品收集 加样完毕后，即可小心加入洗脱剂（注意一定