细胞化学染色法.pptxVIP

细胞化学染色;一、概念;二、临床应用;三、基本步骤;固 定;显示;复 染;四、种类;过氧化物酶染色(POX);原理 Washburn 法 四甲基联苯胺法 改良pereira 染色法;四甲基联苯胺法 H2O2　溶酶体颗粒中的ＰＯＸ　H2O＋O2 四甲基联苯胺　O2　联苯胺蓝 联苯胺蓝＋亚硝基铁氰化钠　O2　蓝色物质　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　（沉淀）　;正常细胞的染色反应 粒细胞系统 　　原粒（可为阴性）　　分叶（阳性程度逐渐增强） 　　嗜酸阳性最强 　　嗜碱阴性 单核细胞系统　阴性或弱阳性，（颗粒少而细） 其他细胞　阴性　;临床评价： 　　辅助诊断急性白血病细胞类型首选、最重要的细胞化学染色。;１、帮助鉴别诊断急性白血病的类型 急性粒细胞白血病： 　　原粒可呈阳性(粗大，局限性分布），阴性不可排除。 急性淋巴细胞白血病： 　　ＦＡＢ规定阳性率〈３％。 急性单核细胞白血病： 原单可为阴性，少数可弱阳性，（少而细小，常弥散分布）。 ;急性早幼粒细胞白血病与急性单核细胞白血病鉴别 　AML-M3 强阳性 组织细胞白血病、恶性组织细胞病与急单 　前两者阴性;2. 成熟中性粒细胞过氧化物酶活性的变化 活性增高：再生障碍性贫血、感染、急性淋巴细胞白血病和慢性淋巴细胞白血病 活性减低：急粒、慢粒、急单、MDS、放射病、退化性中性粒细胞 ;苏丹黑染色;中性粒细胞碱性磷酸酶染色（ＮＡＰ）;中性粒细胞碱性磷酸酶染色（ＮＡＰ）; 正常血细胞染色反应 NAP主要存在于中性成熟粒细胞(杆状\分叶) ; 参考值：成人NAP阳性率10%-40%； NAP积分 40-80分;ＮＡＰ积分增加： 细菌性感染、再生障碍性贫血、骨髓增殖性疾病、慢性粒细胞白血病（加速期、急变期）、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、恶性淋巴瘤、骨髓转移癌、肾上腺糖皮质激素及雄激素治疗后等。 ;ＮＡＰ积分下降： 　慢性粒细胞白血病（慢性期）、阵发性睡眠性血红蛋白尿、骨髓增生异常综合症、恶性组织细胞病等。　;疾病的鉴别 类白血病反应　　慢性粒细胞性白血病 细菌性感染　病毒性感染 急粒　急淋　 恶性淋巴瘤　恶性组织细胞病;5. 恶性组织细胞病　反应性组织细胞增多症 6. 真性红细胞增多症　继发性红细胞增多症 原发性血小板增多症　继发性血小板增多症 8. 再生障碍性贫血 阵发性睡眠性血红蛋白尿;过碘酸-雪夫反应;正常血细胞染色反应;淋巴：大多阴性，少数阳性。 巨核及血小板：阳性 ;临床评价;M5 PAS(+);AML-M6;AML-M7;M7 PAS(+);α-醋酸萘酚酯酶染色;正常血细胞的染色反应 单核细胞、粒细胞、淋巴细胞（均可+） 单核细胞的阳性可被氟化钠抑制。 氟化钠抑制率=抑制前的阳性率/积分-抑制后的 抑制前的阳性率/积分 ×100% ;临床评价： 1、鉴别白血病类型 急单 急粒 急性早幼粒细胞白血病（强阳性，不被抑制） 急性粒单细胞白血病;其他脂酶染色;醋酸AS-D萘酚酯酶染色 染色结果 、临床意义基本同α-NAE染色。 α -丁酸萘酚酯酶染色 临床意义同α-NAE染色，特异性低于α-NAE染色;酸性磷酸酶染色;临床评价： 诊断多毛细胞白血病　 毛细胞呈阳性，阳性反应不被L-酒石酸抑制。　;铁染色;2、正常血细胞的染色反应 贮存铁部位：巨噬细胞和幼红细胞 细胞外铁：骨髓小粒的巨噬细胞中 呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状 可将细胞外铁分为（-）、（+）、（++）（+++）、（++++）。 ;细胞内铁：指存在于中幼红、晚幼红、成熟红细胞中的铁。 铁粒幼红细胞：胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞。 环形铁粒幼细胞：幼红细胞胞质内蓝色颗粒在 10(6)颗以上，围核周2/3(1/2)以上者。;细胞外铁;细胞内铁;环形铁粒幼细胞;结果判读： 细胞外铁： 可分五级标准 (-)：无颗粒 (+)：有少数铁颗粒或偶见铁小珠(颗粒体积大于嗜酸性粒细胞的颗粒者称为铁珠)。 (++)：有较多的铁颗粒和小珠。 (+++)：有很多的铁颗粒、小珠和少数小块状。 (++++)：有极多铁颗粒、小珠，有很多的小块，密集成堆。; 细胞内铁： 用油镜计数100个中、晚幼红细胞，记录胞浆中含有蓝色铁粒的细胞(铁粒幼红细胞)的百分率。 根据细胞内铁颗粒的数目、大小、染