生化工艺第四章沉淀.pptVIP

第四章 沉淀技术;学习目标;沉淀定义;沉淀技术特点及适用范围;第一节 蛋白质沉淀基本原理蛋白质表面特性－蛋白质组成;影响蛋白质溶解度主要因素;二、蛋白质胶体溶液稳定性胶体定义;胶体性质;蛋白质表面特性－蛋白质性质;蛋白质表面特性－沉淀屏障;蛋白质表面特性－沉淀策略及方法;蛋白质表面特性－常用沉淀技术;第二节蛋白质沉淀技术实施一、盐析沉淀;;盐析沉淀-盐析原理;盐析沉淀-盐析原理图示;盐析沉淀影响因素1、无机盐种类与浓度;无机盐选择;最常用(NH4)2SO4 优点：溶解度（767g/L）符合上述要求； 缺点：水解后溶液pH降低，在高 pH下产氨，腐蚀性强，有异味，有毒，终产物必须除尽。 次常用Na2SO4。缺点：在400C以下溶解度较低，主要用于热稳定蛋白。 还有NaCl。;盐析沉淀影响因素;盐析沉淀影响因素;盐析沉淀影响因素;饱与度（Saturation）概念： 以硫酸铵为例： 250C时，硫酸铵饱与溶解度是767g/L 定义为100%饱与度 其它数据见附录;盐析操作-溶解度曲线确定;方法二见p63;二、有机溶剂沉淀1、原理;;有机溶剂沉淀-原理图示;2、特点; 有机溶剂选择首先是要能与水互溶。 沉淀蛋白质与酶常用是乙醇、甲醇与丙酮。 沉淀核酸、糖、氨基酸与核苷酸最常用沉淀剂是乙醇。 乙醇 丙酮;温度 样品浓度 溶液pH值 离子强度:离子强度低有利，