酶联免疫吸附试验ELISA夹心法测定抗原ELISA间接法测定.pptVIP

酶联免疫吸附试验（ELISA） ELISA夹心法测定抗原 ELISA间接法测定抗体 ;原理及意义 酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay ，ELISA)是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体特异性反应与酶对底物高效催化作用结合起来一种敏感性很高新型免疫检测技术。 将已知抗原或抗体吸附在固相载体微孔聚苯乙烯塑料板上，通过抗原抗体特异性结合吸附待测样品中抗体或抗原后，加酶标抗体（酶与抗体或抗原结合后，既不改变抗体或抗原免疫反应特异性，又不影响酶本身活性）与底物后，在相应酶底物作用下生成有色物质，其颜色深浅与标记物中相应抗体或抗原含量呈正比，由此可测定抗原或抗体含量。 常用ELISA法有双抗体夹心法测定抗原与间接法测定抗体。;ELISA法双抗体夹心法测定抗原 1.原理 ;常用试剂盒分一步法与二步法，二者原理完全相同。 一步法 将图中第2步与第3步同时进行，允许混合加入，其形成免疫复合物，基本不影响目测结果，适用于目测结果。 二步法 如图中第2步与第3步由于分步进行，其结果较准确，主要用于需要定量检测时。;2.材料（以测HBsAg为例） 试剂：HBsAg诊断试剂盒 器材：酶联仪，微量加样器，吸头等 ;3.方法 加样：每组7微孔，待检4孔，空白对照1孔，阴、阳性对照各1孔。分别加阴、阳性对照1滴与50ul待测样本于相