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八角莲不定芽的快速培育方式分析 摘要：目的 探讨八角莲根状茎不定芽快速培育的方法。方法 采用L9（33）正交法，对根状茎结节进行浸泡之后，将根状茎栽入培养土中，再用对应的激素水溶液代替自来水进行培养。结果 八角莲不定芽快速培育的最佳处理为：选取根状茎第一节结节，BA1.0mg/L+TDZ0.2mg/L 激素水溶液中浸泡24h，不定芽诱导效果最好，每个根状茎诱导的不定芽数可达5～7个。结论 用激素水溶液对八角莲根状茎进行浸泡预处理和浇灌，能显著提高八角莲不定芽的产量。 　　关键词：八角莲；根状茎；不定芽；快速培育；植物激素 　　　　文献标识码： A 文章编号：2015 　　1 引言 本文由WwW. 提供， 　　八角莲（Dysosma versipellis）为小檗科八角莲属植物，别名一把伞、八角七、八角兵盘七[1]，是我国特有的多年生草本植物及传统的中药，具有抗癌、抗病毒、保肝、免疫调节等作用，在第一批国家珍稀濒危保护植物名录中被列为三级保护对象[2]。野生八角莲主要分布于贵州、四川、江西、湖北、湖南、河南、浙江等地，在桂林也有少量分布[3]。八角莲在自然条件下只进行有性生殖，但由种子萌发到性成熟约需5～6年，繁殖周期长， 繁殖能力低下，生长很缓慢，一般生长数年方能入药[4]。近年来，由于人们过度采挖及其生殖机制的限制，野生八角莲的分布和数量急剧减少，野生资源面临枯竭，严重影响了八角莲在临床上的应用，因此对八角莲进行离体快繁和栽培研究势在必行。但八角莲的组织培养及人工栽培研究均处于起步阶段，组织培养获得完整植株利用的外植体大多为种胚进行培育，用叶片、叶柄、种子、根状茎及根等作为外植体，大多只能诱导愈伤组织[5～8]；在栽培方面，有研究者探索了八角莲的驯化移栽[9]，解决了从野生到人工的转变过程中的温控、病虫害等问题；使用根状茎进行的栽培也基本为有芽栽培[10，11]，但如何对不同结节进行快速诱导不定芽尚无相关报道。本实验以八角莲根状茎为外植体，对其进行分节，采用不同激素配方水溶液浸泡不同时间后移栽，并用相应激素水溶液进行灌溉探讨八角莲不定芽的快速培育方法，为八角莲快繁的研究提供更多的不定芽。 　　2 材料与方法 　　2.1 材料 　　五年生八角莲购自桂林市六合路药材市场，培养土（北京市丰台区新发地鸿华园艺园公司），栽培所用花盆为8号盆，口径24cm。 　　2.2 正交实验设计 　　选用三因素三水平的L9（33）正交表，对激素配方，浸泡时间和结节序数三个因素分别设立3个水平，其中激素配方为：①BA10.0mg/L+GA32.0mg/L；②6-BA1.8mg/LNAA0.2mg/L；③BA1.0mg/L+TDZ0.2mg/L。浸泡时间为：1.24h；2.48h；3.72h。结节序数按顶芽所在的结节为第1结节往后的依次为第2第3结节，其中①第1结节；②第2结节；③第3结节。 　　2.3 根状茎结节的预处理 　　自来水将根状茎表面泥土清洗干净，用洁净的手术刀在结节交界处垂直将根状茎切开，切割时将须根拨至一边，避免损伤。将八角莲根状茎结节按L9（33）正交表浸泡在不同激素配比溶液中；对照组采用自来水进行浸泡处理。 　　2.4 根状茎结节的栽种 　　将所花土按每盆3.2L土壤分装，深度为20cm。每一处理选择5 个根状茎结节，在土深5cm处掩埋，两颗相邻根状茎之间间隔6～7cm，芽头朝上，根朝下，栽培期避免强光直射。每周浇灌一次激素水，对照组浇自来水；若天气过于炎热，则以培养土发白为浇水的标准。 　　2.5 实验数据收集及统计 　　定期观察生 本文由WwW. 提供，长情况，分别记录栽种后15d，30d，45d不定芽的萌发情况，30d时统计萌发率：萌发率（%）=（栽种后芽体总数-栽种前芽体总数）/每组根状茎个数100%，对照组计算方法相同。 　　3 结果分析 　　3.1 激素配比、浸泡时间以及结节顺序对不定芽诱导的影响 　　本实验通过正交设计探讨不同激素组合，浸泡时间及结节序数预处理对八角莲根状茎不定芽诱导的影响，结果表明，对八角莲根状茎结节进行预处理，可以显著提高不定芽的萌发率，与对照组相比，预处理组共长出新芽55个，64.44%的根状茎都长出新芽体，打破了芽的休眠，其中40%的根状茎长出的芽都超过2个，有的甚至多达5～7个，是对照2.2%的18.18倍。从表1可见，进行极差分析，R1与R2相等，均为140gt;80（R3），说明结节顺序和激素配比对根状茎的萌芽影响效应较大，其次是浸泡时间，三者对根状茎萌芽的影响为激素配比=结节数gt;浸泡时间，而浸泡时间与